实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉,前者分布至头顶部和颜面部,后者进入颅内分布至脑和眼眶内。血管发生一个主要因素是由于血管平滑肌细胞转变成为了具有繁殖能力的表型。因此,对动脉血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管的靶向方法。
组织来源
产品规格
货号
用途
颈动脉组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1274
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于人的正常颈动脉组织。
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代 平滑肌 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)elisa检测试剂盒
酰基转移酶(AAT)测试盒
半胱-7(CASPASE-7)
血液超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒
谷草转氨酶GOT/AST测试盒IFCC推荐方法 150ml 紫外比色法
磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体 Anti-phospho-STAT5a(Tyr694)
减数分裂源蛋白1抗体 Anti-RMND1
轴突生长诱导因子3抗体 Anti-NTN3/Netrin-3
端粒酶卡哈尔体蛋白抗体 Anti-WDR79/TCAB1
转录因子ELF1抗体 ELF1
紫外切除修复蛋白RAD23B抗体 RAD23B
核DNA结合蛋白C1D抗体 C1D
核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体 RSK3
NKAIN1蛋白抗体 NKAIN1
P2Y1受体抗体/嘌呤受体抗体 P2Y1
三磷酸腺苷门控阳离子通道蛋白抗体 P2RX4
神经生长因子β抗体 NGFB
DNAJB12蛋白抗体 DNAJB12
D激酶衰减蛋白1抗体 DOK1
磷酸化非受体性蛋白激酶ETK抗体 Phospho-BMX (Tyr566)
磷酸化磷酯酶Cγ1抗体 Phospho-PLCG1 (Tyr783)
表皮生长因子样蛋白2抗体 CELSR2
叉头蛋白P1重组兔单克隆抗体 FOXP1
腺苷酸环化酶Gα蛋白/Gαs/olf抗体 GNAL
锌指蛋白683抗体 ZNF683
大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)elisa检测试剂盒
人颈动脉平滑肌细胞细胞II型L-3羟酰基-CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒
中性红染色液50ml
LBR_HUMAN; LMN2R; PHA; DHCR 14B; DHCR14B antibody Integral nuclear envelope inner membrane protein; Lamin-B receptor; LBR; LMN 2R; LMN2R; MGC9041; PHA; PRO0650; DHCR14B; MGC9041.
人颈动脉平滑肌细胞
人脾脏单核细胞
人胚肺成纤维细胞;HELF (STR)
NCI-H23人肺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;