实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
膀胱癌是一种泌尿生殖系统肿瘤，发病率和死亡率较高，膀胱癌分为非肌浸润性膀胱癌与肌肉浸润性膀胱癌。
肿瘤微环境理论认为，肿瘤微环境与细胞外基质是肿瘤对化疗反应的重要决定因素。肿瘤微环境包括和非细胞，以及细胞外成分，在肿瘤复发和转移中起着重要的作用。其中，非细胞主要由肿瘤相关成纤维细胞构成。
成纤维细胞是实体瘤中主要的细胞，它们结合结缔组织的细胞外基质，是组织结构完整性的基础。已有研究表明，肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤演进的重要促进剂，它们可通过分泌一种或多种可溶性因子如细胞因子、生长因子、趋化因子和基质降解酶等
组织来源
产品规格
货号
用途
膀胱癌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1342
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于手术切除的膀胱癌组织。
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)elisa分析检测试剂盒
肉类（folic acid）含量比色法定量检测试剂盒
小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)elisa分析检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)elisa检测试剂盒
细胞MYC蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
冰冻切片组织CASPASE-8蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
结合态淀粉合成酶(GBSS）测试盒
总微型RNA（miRNA）电泳法分离试剂盒
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa分析检测试剂盒
突触结合蛋白10抗体 Synaptotagmin X
微管蛋白特定伴侣蛋白E抗体 TBCE
RTCD1蛋白抗体 RTCD1
SH3YL1蛋白抗体 SH3YL1
8号染色体开放阅读框K29抗体 C8orfK29
AF647标记的P选择素糖蛋白配体1抗体 PSGL-1/CD162, Alexa Fluor 647
钾离子通道蛋白家族成员4抗体 KCNE4
角蛋白相关蛋白KAP3.3抗体 KAP3.3
乙酰化化组蛋白H2B (Lys12)鼠单克隆抗体 Histone H2B (Acetyl K12)
硬脂酰辅酶A去饱和酶5抗体 SCD5
二氢乳清酸脱氢酶抗体 DHODH
防御素α4抗体 Neutrophil defensin 4
GRAM结构域蛋白2抗体 GRAMD2
G蛋白偶联受体19/GPCR GPR4抗体 GPR19/GPR4
囊泡转运蛋白SEC20 抗体 BNIP1
盘状结构域受体蛋白2单克隆抗体 DDR2/CD167b
动物乳腺组织细胞分离培养试剂盒
人膀胱癌相关成纤维细胞Rabbit Anti-Avidin / Cy5
CD39样蛋白2/ENTPD6抗体
GKAP/SAPAP interacting protein; SH3 and multiple ankyrin repeat domains 1; SH3 and multiple ankyrin repeat domains protein 1; SHANK-1; SPANK 1; Somatostatin receptor interacting protein; Somatostatin receptor-interacting protein; SH3 and multiple ankyrin repeat domains protein 1; SSTR-interacting protein; SPANK1; SSTR interacting protein; SSTRIP; SHAN1_HUMAN; Synamon.
人膀胱癌相关成纤维细胞
人脑微血管内皮细胞
人卵巢癌细胞；3AO
NCI-H524人非小细胞肺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；