实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
乳腺癌是一种严重影响女性健康甚至危及生命的恶性肿瘤之一，其发展不仅是肿瘤细胞本身的作用，而且与肿瘤微环境密切相关。
癌组织由实质和间质两部分构成，癌细胞构成癌实质，是癌的主要成分，具有组织来源特异性，癌间质一般由结缔组织和血管组成，起支持和营养癌实质的作用，不具有特异性。
当实体瘤超过 1-2mm时，需要通过新生的血管和活化的癌相关成纤维细胞来获取癌细胞生长和增殖所必须的营养物质。其中，癌相关成纤维细胞可通过分泌多种细胞因子和生长因子来发挥促进癌血管**的作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
乳腺癌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1388
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于人乳腺癌组织。
2)细胞鉴定：Vimentin荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：梭形细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
甘油含量测试盒测定组织样本 100T 微量酶标法
INO80E蛋白抗体
INO80E
锚蛋白重复域6抗体
ANKRD6
小鼠CD44分子(CD44)elisa检测试剂盒免费代测
两步法RT－PCR荧光定量试剂盒
细胞AKT蛋白表达比色法定量检测试剂盒
植物花色苷测试盒
MPP4蛋白抗体
MPP4
20号染色体开放阅读框11抗体
C20orf11
肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制基因) Anti-TP53I13
维甲酸受体γ抗体 Anti-RAR gamma/Retinoic Acid Receptor gamma
孤菲肽受体/痛敏肽受体抗体 Anti-Nociceptin receptor
血管非炎症分子1抗体 Anti-VNN1
扭转原肠胚形成源蛋白1抗体
TWSG1
过氧化物酶体2抗体
DECR2
炎症负调控因子蛋白抗体 Anti-SELS
锌指蛋白339抗体 Anti-OVOL2/ZNF339
磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 Anti-Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)
先心病相关蛋白TBX1抗体 Anti-TBX1/Brachyury
大鼠高灵敏度促甲状腺(U-TSH)elisa分析检测试剂盒
人乳腺癌相关成纤维细胞小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)elisa检测试剂盒
人变肾上腺素(MN)elisa检测试剂盒
Beta-coat protein; betacop; Coatomer beta subunit; Coatomer protein complex subunit beta 1; Coatomer protein complex subunit beta; Coatomer subunit beta; COPB; COPB1; DKFZp761K102; FLJ10341; COPB_HUMAN.
人乳腺癌相关成纤维细胞
人颈静脉球瘤细胞
人前列腺癌细胞；LAPC4
NIT-1小鼠胰岛素瘤β细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；