实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
食管癌是常见的六大恶性肿瘤之一，而我国是高发区之一。食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤。细胞主要呈多角形，大小不等，胞浆丰富，胞核呈圆形或卵圆形，大小不等。此外，有研究表明，大部分来自于上皮的肿瘤细胞中均存在角蛋白。
肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤微环境中主要的细胞成分之一，在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
食管癌组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1325
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于人食管癌组织。
2）细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
4）细胞生长方式：长梭形，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
GFAPELISAKit
大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)elisa分析检测试剂盒
LIFR ELISA Kit
人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa分析检测试剂盒
HumanTIMP-3ELISAKit
运动神经元生存蛋白1 Anti-SMN1
磷酸化染色体浓缩调控蛋白1抗体 Anti-Phospho-RCC1 (Ser11)
细胞粘附分子3抗体（受体相关蛋白3） Anti-Nectin 3
锌指蛋白146抗体 Anti-ZNF146
鱼热休克蛋白40(HSP-40)elisa分析检测试剂盒
HSP-40 ELISA Kit
人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)elisa分析检测试剂盒
Humanenterovirus71virus(EV71)antibody(gM)ELISAkit
糖原磷酸化酶a（GPa）试剂盒
细胞牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）
溶酶体膜通透性（LMP）吖啶橙荧光检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)elisa检测试剂盒
NDUFS8蛋白抗体
NDUFS8
6号染色体开放阅读框57抗体
C6orf57
微管蛋白4α抗体 Anti-TUBA4A
磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228)
少突胶质细胞转录因子2抗体 Anti-OLIG2
分泌细胞凋亡相关蛋白1抗体 Anti-SFRP2/SARP1
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗人IgG H&L
人食管癌相关成纤维细胞大鼠胰岛素受体(ISR)elisa检测试剂盒
鱼肝油维生素A含量荧光定量检测试剂盒
LAMB 2; LAMB2; LAMC 1; LAMC1; LAMC1_HUMAN; Laminin B2 chain; Laminin gamma 1; Laminin gamma 1 chain; MGC87297.
人食管癌相关成纤维细胞
人角膜内皮细胞
人肥大细胞；HMC-1
OLN-93（大鼠少突胶质前体细胞系）
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；