实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段,分别为十二指肠,空肠和回肠。小肠壁结构一般分 4层,由外向内依次为:浆膜层,平滑肌层,粘膜下层和粘膜层。粘膜层又分为3层:靠近粘膜下层的是一层平滑肌,称为粘膜肌层。其次为结缔组织,又称为固有层。后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘膜。
成纤维细胞是结缔组织中常见的细胞,电镜下,成纤维细胞胞质内可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和高尔基复合体,表明其具有合成和分泌蛋白质的功能。己知成纤维
组织来源
产品规格
货号
用途
小肠组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1291
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)细胞来源于手术切除的正常小肠组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠乙酰胆碱(Ach)elisa检测试剂盒
小鼠程序性死亡1(PD-1)elisa检测试剂盒
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6号染色体开放阅读框195抗体 C6orf195
基质金属蛋白酶27抗体 MMP27
甲硫氨酸腺苷转移酶2β亚基/MAT IIβ抗体 MAT2B
RAN结合蛋白1抗体 RanBP1
Rh血型C抗原抗体 RHCE
丝氨酸消旋酶抗体 Serine racemase
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FITC标记小鼠CD154单克隆抗体 Mouse CD154/FITC
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氯霉素抗体 Chloramphenicol
膜孕受体α/mPRα抗体 MPRA
电子转移黄素蛋白α抗体 ETFA
多囊肾因子1蛋白抗体 PKD2L1
嗅觉受体5K4抗体 OR5K4
胰腺癌转移相关蛋白RLLM1抗体 RLLM1
大鼠总胆汁酸(TBA)elisa检测试剂盒
人小肠成纤维细胞Mouse IgG
多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗体
Ubiquitin specific protease 1; UBP; UBP1_HUMAN; Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 1; Deubiquitinating enzyme 1; hUBP; Ubiquitin thioesterase 1; Ubiquitin-specific-processing protease 1.
人小肠成纤维细胞
人冠状动脉平滑肌细胞
未分化肠上皮细胞;HENLE-407
PATU8988S人胰腺癌细胞
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;