实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。其中，机械分散法的特点是简便、快速，但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差，适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
细胞简介：
直肠是自肛缘起向上 375px的一段大肠。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠横切面由内到外依次为：粘膜（上皮层，固有层，粘膜肌层），粘膜下层，肌层，外膜。其中，上皮细胞主要位于粘膜层的上皮层，为单层柱状上皮,含较多的杯状细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
直肠组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X1305
仅供科研研究实验
细胞特性：
1）细胞来源于手术切除的正常直肠组织。
2)细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：铺路石样，多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品：
大鼠双氢睾酮(DHT)elisa检测试剂盒
大鼠穿孔素1(PRF1)elisa检测试剂盒
小鼠生长停滞特异性蛋白6(GAS6)elisa检测试剂盒
人Rho GDP解离抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)elisa分析检测试剂盒
细胞EPHB4激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
猴补体片断3b(C3b)elisa分析检测试剂盒
柠檬酸化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒
小鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)elisa检测试剂盒
大鼠P物质(SP)elisa分析检测试剂盒
锌指蛋白99抗体 ZNF99
雄受体抗体 Androgen receptor
促甲状腺素受体抗体 TSHR
蛋白O岩藻糖基转移酶1抗体 POFUT1
ENPP4蛋白抗体 ENPP4
FAM210B蛋白抗体 FAM210B
磷酸化天冬氨酰氨基肽酶(S109)抗体 phospho-DNPEP (Ser109)
磷酸化真核翻译起始因子4B抗体 phospho-EIF4B (Ser406)
14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亚型抗体 14-3-3 Alpha + Beta + Gamma + Delta + Epsilon
1号染色体开放阅读框54抗体 C1orf54
环指蛋白21抗体 RNF21
肌管素相关蛋白2抗体 MTMR2
PE标记人CD105单克隆抗体 human CD105/PE
PE标记小鼠Ly-6C单克隆抗体 mouse Ly-6C/PE
视杆细胞相关蛋白MREG抗体 DSU
丝氨酸蛋白酶45抗体 PRS45
（TOLUIDINE BLUE）原位染色试剂盒
人直肠上皮细胞人球蛋白M（IgM）elisa检测试剂盒
大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa检测试剂盒
Gamma-glutamyltransferase 7 heavy chain; D20S101; dJ18C9.2; Gamma glutamyltransferase 4; Gamma glutamyltransferase 7; Gamma glutamyltransferase like 3; Gamma glutamyltransferase like 5; Gamma glutamyltranspeptidase 7; Gamma glutamyltranspeptidase like 3; GGT 7; GGT4; GGTL3; GGTL5; GGT7_HUMAN.
人直肠上皮细胞
人肝外胆管上皮细胞
RKO人结肠癌细胞
RAG小鼠肾腺癌细胞
实验具体步骤：
（1）动物福利：小鼠麻醉牺牲/处死，或者断颈处死；
（2）小鼠：可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min，然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净； （3）取出心脏组织：用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔，取出心脏组织，置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中； （4）组织：在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二，充分洗涤里边的血液，/3次，每次5min； （5）破碎组织：使用眼科钳或者剪刀，将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块；（备注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min，
利于后期细胞从组织块中爬出来，同时能够消除部分结缔组织等）
镊子将组织块种植于培养皿中（备注：破碎组织块可能还含有液体，可以在一个无菌培养皿底沾几下，把液体）；种植完成后，可以将培养皿正置3-5小时，然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜（也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜）；
（7）培养基培养：将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基，然后在恒温潮湿细胞培养箱（37℃，5% CO2）培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况，一般3-5 day能够达到传代的爬出效率；
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中；