实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
近年来,有关干细胞的研究是生物技术领域的热点之一。胚胎成纤维细胞具有相对容易获得,增殖能力强等特点,因此胚胎成纤维细胞常作为哺乳动物干细胞培养的饲养层细胞,主要分泌谋学细胞因子,如成纤维细胞生长因子,白血病抑制因子等,以促进干细胞增殖及抑制分化。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
组织来源
产品规格
货号
用途
胚胎组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2316
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 细胞来源于实验动物正常胚胎组织。
2) 细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
化妆品糖精(saccharin)含量紫外光谱法定量检测试剂盒
动物组织镁ATP酶(Mg++ -ATPase)活性比色法定量
人高半胱氨酸(Hcy)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠胱抑素D(CST5)elisa分析检测试剂盒
植物氨态氮测试盒
山羊碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)elisa检测试剂盒
食品三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒(家用型/工业型)
冰冻切片线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒
大鼠脂蛋白脂肪酶(LPL)elisa检测试剂盒
组织相容性抗原H抗体 HLA-H
1号染色体开放阅读框130抗体 C1orf130
环指蛋白105抗体 RNF105
肌氨酸脱氢酶抗体 SARDH
PerCP-Cy5.5标记人CD105单克隆抗体 human CD105/PerCP-Cy5.5
PE标记人TCR α/β单克隆抗体 human TCR α/β/PE
生长分化因子7抗体 GDF7
双链RNA结合蛋白Staufen抗体 Staufen
E选择素抗体 E-Selectin
FARSLB蛋白抗体 FARSLB
磷酸化细丝蛋白A抗体 phospho-Filamin A (Ser1083)
磷酸化自噬相关蛋白1抗体 Phospho-ATG1 (Ser556)
大鼠细小病毒H-1株(H-1)抗体 Parvovirus Capsid protein VP1
蛋白聚糖Versican抗体 Versican
锌指蛋白635抗体 POGZ/ZNF635
嗅觉受体52I1抗体 OR52I1
小鼠葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)elisa检测试剂盒
鸭胚胎成纤维细胞Goat Anti-Mouse IgM / PE
髓系细胞触发受体样转录因子2抗体
CBF5; CBF5 homolog; Cbf5p homolog; DKC 1; DKC; Dkc1; DKC1_HUMAN; DKCX; Dyskeratosis congenita 1; Dyskeratosis congenita 1 dyskerin; Dyskerin; H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 4; NAP 57; NAP57; NAP-57; NOLA 4; NOLA4; Nopp140 associated protein of 57 kDa; Nopp140-associated protein of 57 kDa; Nucleolar protein family A member 4; Nucleolar protein NAP57; snoRNP protein DKC1; XAP 101; XAP101.
鸭胚胎成纤维细胞
大鼠骨骼肌细胞
M14人黑色素瘤细胞
人食管癌细胞;TE-13 (STR)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;