实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
骨髓间充质干细胞是骨髓基质干细胞,对骨髓中的造血干细胞(HSC)不仅有机械支持作用,还能分泌多种生长因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)来支持造血。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潜能,能促进间充质组织的再生,如:骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱、脂肪及基质等组织。
在骨髓中,BMSCs占骨髓有核细胞总数的0.001%~0.1%,含量极低。而同时,由于组织工程需要大量的种子细胞,从啮齿类动物骨髓分离BMSCs的技术上的难度耀ãή
组织来源
产品规格
货号
用途
骨髓血组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2302
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。
2)细胞鉴定:CD44荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 间质 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
小鼠白介素12(IL-12/P40)elisa检测试剂盒
人骨钙素(Osteocalcin)elisa检测试剂盒
组织科萨基病毒B(Coxsackievirus B)定量PCR扩增检测试剂盒
鱼11-酮睾酮(KT)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠神经生长因子诱导蛋白B(NGFIB)elisa检测试剂盒
分泌素抗体 Anti-Secretin
脱氢酶13抗体 Anti-RDH13
轴突蛋白1β/Neurexin 1β抗体 Anti-Neurexin 1 beta
包含氧化还原酶的WW域抗体 Anti-WWOX
钠钾离子转运蛋白1抗体 NKCC1/SLC12A2
内皮细胞粘附分子抗体 ESAM
FITC标记人TDT单克隆抗体 human TDT/FITC
FUT5抗体 FUT5
亚铁氧化酶抗体 Hephaestin
胰岛素样生长因子-II抗体 IGF2
电压门控性钾通道蛋白Kv1.4抗体 Kv1.4
多聚腺苷酸结合蛋白抗体 PABP
通用转录因子2H亚基3/TTFIIH p34抗体 GTF2H3
突触融合结合蛋白6抗体 Amisyn
REG3G单克隆抗体 REG3G
S100钙结合蛋白A12抗体 S100A12
5-羟色胺受体3B抗体 5HT3B receptor
9号染色体开放阅读框174抗体 C9orf174
甲基化CpG结合蛋白抗体 MBD1
解旋酶DEAD5抗体 DDX19B
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa检测试剂盒
羊骨髓间充质干细胞Rabbit Anti-Horse IgG H&L / Gold
GALNT3蛋白抗体
BRI3-binding protein; HCCR-1; HCCR1; HCCRBP-1; I3-binding protein; Cervical cancer 1 proto-oncogene-binding protein KG19; I3-binding protein; BRI3B_HUMAN; BRI3BP.
羊骨髓间充质干细胞
大鼠宫颈上皮细胞
MOG-G-UVW人脑部多形性成釉细胞瘤细胞
人涎腺腺样囊性癌细胞;SACC-LM
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;