实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
前列腺位于膀胱颈下方,包绕着膀胱口与尿道结合部位。形态不一,腺腔不规则。前列腺中间质较多,富含弹性纤维。前列腺炎导致前列腺组织产生具有纤维增生特点的病理改变,如腺泡周围组织增生,纤维化、腺泡猥琐等,出现排尿困难、尿不尽等排尿梗阻的临床症状。因此,体外培养前列腺成纤维细胞是研究前列腺炎等的前提和基础。
组织来源
产品规格
货号
用途
前列腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2265
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常前列腺组织。
2)细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 DELF 原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
大鼠和肽素(copeptin)elisa分析检测试剂盒
仓鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)elisa检测试剂盒
小鼠胱抑素C(Cys-C)elisa检测试剂盒
昆虫膜蛋白提取试剂盒100T
石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色试剂盒
人踝蛋白(talin)elisa分析检测试剂盒
水中肠杆菌(E. coli)基因荧光定量检测试剂盒
猪5羟色胺(5-HT)elisa检测试剂盒
大鼠细胞色素P450(CYP450)elisa检测试剂盒
DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗体 POLK
EFCAB5蛋白抗体 EFCAB5
磷酸化活化复制因子2抗体 phospho-ATF2 (Ser94)
磷酸化神经突触素1抗体
补体C1RL链多肽抗体 C1RL
成纤维细胞生长因子19抗体 FGF19
小鼠NK1.1单克隆抗体 mouse NK1.1
锌指蛋白237抗体 ZNF237
Pacific Blue标记人/小鼠CD11b单克隆抗体 human/mouse CD11b/Pacific Blue
PE-Cy7标记人CD64单克隆抗体 human CD64/PE-Cy7
神经突触前膜胞内蛋白18抗体 STXBP1/Munc18-1
生肌决定因子Myf5抗体 MYF5
核小体组装蛋白1样蛋白4抗体 NAP1L4
踝节菌属葡聚糖酶抗体 Dextranase
转录因子12抗体 TCF12
组蛋白相关Bmi1抗体 PCGF4/BMI1
石蜡切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
猪前列腺成纤维细胞小鼠纤维蛋白原α(FGα)elisa检测试剂盒
人白介素-11(IL-11)elisa检测试剂盒
Beta catenin like 1; Beta catenin like protein 1; Beta-catenin-like protein 1; C20orf33; Catenin beta like 1; Chromosome 20 open reading frame 3; CTBL1_HUMAN; CTNNBL 1; Ctnnbl1; NAP; Nuclear associated protein; nuclear protein NAP; Nuclear-associated protein; NYD SP19; P14 antibody P14L; Testis development protein NYD SP19; Testis development protein NYD-SP19.
猪前列腺成纤维细胞
大鼠肺微血管周细胞
NCI-H1651人非小细胞肺癌细胞
未分化肠上皮细胞;HENLE-407
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;