实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
胰腺分为外分泌腺和腺两部分。其中,外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。
通过对胚胎发育的研究,发现胰岛是由一组CK19阳性的胰腺导管上皮细胞在一定发育阶段向外分泌组织中移行形成的。据此,剔除胰腺的成体干细胞存在于胰腺导管上皮细胞中,研究者称其为胰腺导管上皮样细胞。
组织来源
产品规格
货号
用途
胰腺组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2271
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常胰腺组织。
2) 细胞鉴定:CK19荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:铺路石状,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
Tie-1ELISAkit
猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa分析检测试剂盒
hs-CRP ELISA Kit
人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)elisa分析检测试剂盒
UGT2B4ELISAKit
豚鼠白介素4(IL-4)elisa检测试剂盒
体液CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒
羊环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
大鼠趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)elisa检测试剂盒
A型流感病毒H5N1神经氨酸酶1抗体
Influenza A Neuraminidase 1
22号染色体开放阅读框39抗体
C22orf39
小鼠p16基��甲基化检测试剂盒
人Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)elisa检测试剂盒
大鼠BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)elisa检测试剂盒
小鼠球蛋白G4(IgG4)elisa检测试剂盒
蛋白C激活肽抗体
protein C Activation peptide
细胞纤毛内转运源蛋白172抗体
IFT172
神经突起生长诱导因子受体UNC5B抗体 Anti-UNC5H3/UNC5C
11号染色体开放阅读框73抗体 Anti-C11orf73
磷酸乙醇胺转移酶2抗体 Anti-PCYT2
丝氨酸棕榈酰转移酶1抗体 Anti-SPTLC1
辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG H&L
猪胰腺导管上皮细胞猫白介素4(IL-4)elisa检测试剂盒免费代测
D-Hanks' 平衡盐溶液,含酚红500ml
NPAP60; NPAP60L; Nuclear pore-associated protein 60 kDa-like; nucleoporin 50; NUP50_HUMAN.
猪胰腺导管上皮细胞
大鼠肠粘膜上皮细胞
NCI-H1915人非小细胞肺癌细胞
小鼠骨样细胞;MLO-Y4 (种属鉴定)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;