实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
肠神经系统胶质细胞类似神经系统的星形胶质细胞,肠神经系统以网络结构广泛分布于浆膜下层、纵肌层、肌间层、环肌层、深肌层、粘膜肌层和粘膜层。肠神经胶质主要位于肠肌间丛和粘膜下丛神经节,与神经节交织成团并与节间神经束相互连接。
肠神经胶质不但对神经系统起支持作用,还在调控神经元生长、发育、神经回路功能和细胞凋亡过程中起重要作用。
组织来源
产品规格
货号
用途
肠组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2311
仅供科研研究实验
细胞特性:
1) 组织来源于实验动物的正常肠组织。
2) 细胞鉴定:GFAP荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代 胶质 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase;PG)活性比色法定量检测试剂盒
细胞VEGF蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)elisa分析检测试剂盒
通用型1毫升1厘米光径玻璃比色皿
小鼠雌硫酸转移酶(SULT1E1)elisa检测试剂盒
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体液肌酸激酶(CK)总活性酶连续循环比色法
小鼠皮质醇(Cortisol)elisa检测试剂盒
大鼠冠蛋白1A(CORO1A)elisa检测试剂盒
磷酸化信号转导和转录激活因子4抗体 Phospho-Stat4 (Tyr693)
磷酸化组蛋白去乙酰化酶3抗体 Phospho-HDAC3 (Ser424)
E3泛素蛋白连接酶HECW2抗体 NEDL2
ERK2结合睾丸蛋白1抗体 MICALCL
锌指蛋白671抗体 ZNF671
锌指蛋白ZBTB7C抗体 ZBTB7C
肠高血糖素相关肽抗体 GRPP
促性腺释放1抗体 GnRH I/GnRH
输卵管特异性糖蛋白抗体 OVGP1
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK1抗体 SIK1
PE-Cy5标记小鼠CD25单克隆抗体 Mouse CD25(IL2RA)/PE-Cy5
PE标记人CD223 (LAG-3)单克隆抗体 human CD223 (LAG-3)/PE
组蛋白去乙酰化酶4+5+9抗体 HDAC4 + 5 + 9
16号染色体开放阅读框84抗体 CTU2
恒定生物钟源蛋白TIM1抗体 Timeless
肌动蛋白样蛋白9抗体 ACTL9
生长(GH)elisa分析检测试剂盒
狗肠神经胶质细胞Chicken IgM / PE
G蛋白偶联受体20抗体
Uba1; A1S9; A1S9 protein; A1S9T and BN75 temperature sensitivity complementing; A1S9T; A1ST; GXP 1; GXP1; MGC4781; Protein A1S9; UBA1_HUMAN; UBE 1 ; UBE 1X; UBE1; UBE1X; Ubiquitin activating enzyme E1; Ubiquitin-activating enzyme E1; Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 1.
狗肠神经胶质细胞
大鼠肠间质细胞
NCI-H1993人非小细胞肺癌细胞
小鼠精母细胞;GC-2 spg (种属鉴定)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;