实验方法:
一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,可采用低速离心。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。 二、实体组织材料的分离方法 对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。其中,机械分散法的特点是简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。消化分离法是指把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
细胞简介:
输卵管是卵子运输、储存、获能,以及卵母细胞采取、运送、成熟、受精和早期胚胎发育的重要场所。输卵管上皮细胞体外培养可以用于饲养层细胞,与胚胎共培养,克服胚胎的发育阻滞现象。因此,体外培养输卵管上皮细胞,不但可以进一步了解影响生殖微环境变化的因素,而且还可以建立输卵管上皮细胞与胚胎共培养体系,研究输卵管上皮细胞对胚胎体外发育的影响。
组织来源
产品规格
货号
用途
输卵管组织
5×105cells/T25细胞培养瓶
A01X2308
仅供科研研究实验
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常输卵管组织。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用 Delf原代 上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
公司正在出售的产品:
人精氨酸酶(Arg)elisa检测试剂盒
牛(SS)elisa分析检测试剂盒
电镜组织基吡啶固着液(2,4,6-Trimethylpyridine puriss)
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)elisa检测试剂盒
大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa检测试剂盒
人β淀粉样多肽42(Aβ 42)elisa检测试剂盒免费代测
体液甲羟戊酸(mevalonate)含量高效液相层析-质谱法定量检测试剂盒
小鼠微粒体甘油三酸酯转运蛋白(MTTP)elisa检测试剂盒
大鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)elisa检测试剂盒免费代测
锌指蛋白347抗体 ZNF347
锌指蛋白735抗体 ZNF735
补体C1qγ链多肽抗体 C1QC
成纤维细胞核受体Nr5a2抗体 NR5A2
DNA聚合酶δ 抗体 DNA polymerase delta
EDC3蛋白抗体 EDC3
磷酸化红细胞**素受体抗体 phospho-EPO Receptor (Tyr485)
磷酸化上皮钙粘附分子抗体 Phospho-E Cadherin (Ser838 + Ser840)
自噬相关蛋白4A抗体 ATG4A
组织蛋白酶H抗体 Cathepsin H
核纤层蛋白B抗体(细胞核膜标志物) [KO验证抗体] Lamin B1
互养蛋白1,2,3抗体 Syntrophin-1+2+3
P53诱导细胞凋亡抑制蛋白抗体 NME5
PE-Cy7标记人CD279 (PD-1)单克隆抗体 human CD279 (PD-1)/PE-Cy7
神经调节蛋白1β2抗体 HRG1
水通道蛋白4单克隆抗体 Aquaporin 4
Caspase 9抑制剂1400ul
鸡输卵管上皮细胞小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa检测试剂盒
猴催乳素(PRL/LTH)elisa检测试剂盒免费代测
Nucleoporin 37kDa; Nucleoporin Nup37; Nup107-160 subcomplex subunit Nup37; Nup37; NUP37_HUMAN; p37.
鸡输卵管上皮细胞
大鼠NK细胞
NCI-H2052人间皮瘤细胞
小鼠气道平滑肌细胞;ASMC (种属鉴定)
实验具体步骤:
(1)动物福利:小鼠麻醉牺牲/处死,或者断颈处死;
(2)小鼠:可以将小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者简单粗暴的使用75%乙醇在烧杯中浸泡3min,然后转移至无菌操作台使用无菌吸水纸/棉花将酒精擦拭干净; (3)取出心脏组织:用眼科剪在镊子的配合下打开腹腔,取出心脏组织,置于含有2X双抗冰冷PBS的培养皿中; (4)组织:在含有2X双抗PBS中将心脏一分为二,充分洗涤里边的血液,/3次,每次5min; (5)破碎组织:使用眼科钳或者剪刀,将心脏组织剪碎至1-3 mm3大小组织块;(备注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml胶原酶Ⅰ于37℃联合消化组织3-5 min,
利于后期细胞从组织块中爬出来,同时能够消除部分结缔组织等)
镊子将组织块种植于培养皿中(备注:破碎组织块可能还含有液体,可以在一个无菌培养皿底沾几下,把液体);种植完成后,可以将培养皿正置3-5小时,然后更换培养皿的 盖子正置放置过夜(也可以使用封口膜密闭培养皿在4℃正置过夜);
(7)培养基培养:将组织块中轻柔缓慢的加入完全培养基,然后在恒温潮湿细胞培养箱(37℃,5% CO2)培养48h后观察单个细胞从组织块中爬出情况,一般3-5 day能够达到传代的爬出效率;
根据细胞数量种植到对应的培养皿/瓶中;