DNA变性是指核酸双螺旋结构中碱基对的氢键断裂,使得双链变为单链的过程。
对双链DNA进行加热可以使其发生变性,当温度升高到一定高度时,DNA在260nm处的吸光度会突然发生明显的上升,并达到zui 大值,之后温度继续上升,其吸光度也不会发生明显变化,若以温度对DNA溶液的260nm吸光度做图,会得到典型的DNA变性S型曲线。
DNA的变性是在一个很窄的温度范围内发生的,通常将核酸加热变性过程中,紫外光吸收值达到zui 大值50%时的温度称为核酸的熔解温度 (Tm, melting temperature)。
1. 特定核酸分子的Tm值与其G+C含量成正相关,GC% = (Tm-69.3) × 2.44;
2. Tm值的大小还与核酸分子的长度有关,核酸分子越长,Tm值越大;
3. 粒子强度越高,熔解温度越高,熔解温度范围越窄。