我们熟知且常用的转染方法主要有物理介导,化学介导,生物介导。
物理介导方法:电穿孔法、显微注射和基因枪;
化学介导方法:如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;
生物介导方法:有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。
但实验室使用较多的主要有化学介导中的脂质体转染(质粒转染)和生物介导中的慢病毒转染法。其中质粒转染操作简单,一般瞬时转染选择较多,但有些细胞系不容易转染,因此选择转染方式时一定要做足功课,亲身经历告诉我,千万不要图方便,否则转染效率简直崩溃。特别是养原代细胞的小伙伴,一点要认真选择!病毒转染一般具有能够稳定表达的优势,且其对原代细胞有较高的转染效率,其中更分为慢病毒转染,逆转录病毒转染和腺病毒转染,其中腺病毒转染可适合更为难转染的细胞,例如悬浮细胞、T细胞、raw细胞等难转染细胞。