ELISA包被抗原过程:
1. 用 50mM 的碳酸盐包被缓冲液(pH 9.6)溶解抗原,使抗原浓度为 10-20 μg/ ml, 加 100 μl/孔到 96 孔酶标板, 4 oC 放置过夜。
2. 第2天弃
去包被液后, 用 PBST 洗涤 3 次,每孔加入 150 μl 1% BSA 37 oC
封闭 1 小时。
3. PBST 洗涤 3 次后,每孔加入 100 μl 不同倍比稀释度的血清,并加入对照样
品, 37 oC 孵育 2 小时。
4. PBST 洗涤 5 次后,加入 100μl 稀释后的 HRP 标记的二抗,37 oC 孵育 1 小时。
5. PBST 洗涤 5 次后,显色剂显色 20min 后,酶标仪上读取 A405 吸收值。