ELISA检测试剂盒试验过程主要有检测板、包被缓冲液、捕获抗体、封闭缓冲液、靶抗原、检测抗体、酶偶联物、洗涤液、底物、信号检测的质量和完整性都会干扰正确的ELISA测试。一些可能干扰测试的因素如下:
1.微孔板:孔的形状和质量、板的材料、潜在的预激活、均匀或不均匀的涂层。
2.缓冲液:pH、污染。
3.捕获和检测抗体:孵育时间、温度、特异性、滴度、亲和力。
4.封闭缓冲液:交叉反应、浓度、污染。
5.靶抗原:构象、稳定性、表位。
6.酶结合物:类型、浓度、功能、交叉反应。
7.清洗:污染、频率、体积、持续时间、成分。
8.基板:微孔板的质量、材质。
9.检测:检测相关的仪器设备:比如:分光光度计、读板机等相关因素。
10.误差:人为误差(实验步骤不规范等)。