恙虫病东方体探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
试剂盒简介货为了适应恙虫病东方体探针法荧光定量PCR试剂盒快速检测和疫病研究的需要,本公司参照 OIE 国际标准中规定的引物序列,经多次实验及系统优化,开发**了本试剂盒。应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、**操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。
2、试剂盒组成:
试剂盒组成包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂,具体组成参见表 1:s
表 1:试剂盒组成(50test/盒)
样本处理及要求:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
试剂盒组成及试剂配制:
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
样本:血清 血浆 组织匀浆等液体样本
标记物:血清 血浆 组织匀浆等
应用:仅用科研实验检测定量,定性检
检测方法:夹心法
技术要求:全程按说明书步骤检测,操作规范,专业,仪器设备齐全。
规格:48t/96t
性状:液体
运输方式:快递发货
有效期:6个月品
特点:灵敏性高,---性,吸附均匀,吸附性好,回收利用率高,是一款可以让您放心选购的产品。
使用范围:此产品供科研实验使用,不得用于---。
用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。