产品名称: 血小板反应蛋白4试剂盒 英文名称:详见说明书 规格:48T/96T 货号:BJ-100140 特点:灵敏性高、特异性强、重复性好 用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断 运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式) 试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。 待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
参数: 保存条件:2-8℃低温保存 保质期:6个月,所有试剂盒均提供新批次。 试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。 选规格: 产品规格:48T/96T 48T指可以做37个样本 96T指可以做85个样本 主要成分:酶标板,试剂,标准品等。 试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。 检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本.. 实验流程: 1. 实验前标准品、试剂及样本的准备; 2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时; 3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时; 4. 洗板3次; 5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟; 6. 洗板5次; 7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟; 8. 加终止液50µL,立即450nm读数。 备试剂与收集血样: 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。 2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。 3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水) 检测程序: 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。 3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
操作步骤: 1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品*终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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