产气肠杆菌

菌种的培养：产品仅用于科研

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯**菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的**菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在**上延续使用半年左右。

6、如果有些**菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 放线菌孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为种子，把种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

产气肠杆菌微生物培养方法：

1、平板划线分离法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落。

2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。

上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的，但平板划线分离法不能对菌落计数，而稀释涂布平板法培养过程复杂，对平板的要求比较高，可参照以下步骤：

a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃，向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均匀，然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿，轻轻摇动培养皿，使培养基溶液均匀分布在培养皿底部，待培养基溶液凝固后即得平板培养基。

b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g，放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇15～20min混合均匀，用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，制成活性污泥混合液。

c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培养基表面的中央位置，用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展，使之分布均匀。

Ratpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISA试剂盒大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒规格：96T/48T 醋酸普兰林肽  Pramlintide Acetate  质量规格：度≥98.0%

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒 ，英文名： GP-MM ELISA Kit 普伐他丁钠（标准品）  Pravastatin    质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T 普伐他丁钠  Pravastatin    质量规格：>98%

人骨退化特异标志物(CTX-2)试剂盒 Human CTX-2 ELISA Kit 泼尼松龙  Prednisolone  质量规格：>98.5%,USP/BP

RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit大鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 泼尼松龙（标准品）  Prednisolone  质量规格：HPLC>98%,标准品

751型分光光度仪1毫升1厘米光径塑料比色皿1个 匹莫范色林；哌马色林  Pimavanserin;ACP-103  质量规格：>98%,5-HT2A高效选择性激动剂

MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISA试剂盒小鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒规格：96T/48T 富马酸喹硫平  Quetiapine Fumarate  质量规格：>99%

小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 ，英文名： GP-II ELISA Kit 富马酸喹硫平（标准品）  Quetiapine Fumarate  质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T 雷特格韦钾  Raltegravir K  质量规格：含量>98.5%,BR

人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit 雷特格韦  Raltegravir  质量规格：>98.5%,BR

T7 DNA Polymerase

产品规格：BR，10u/ul

包装：300U

分子量：由2个亚基组成，804kDa多肽（T7噬菌体基因5表达产物）和12kDa硫氧还蛋白（大肠杆菌trxA基因表达产物）

级别：BR

来源：两个大肠杆菌菌株，一个菌株含有T7噬菌体克隆基因5，另一个菌株含有大肠杆菌克隆基因trxA

浓度：10u/ul

活力定义：在37°C条件下，30分钟内能使10 nmol 的脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段（吸附在DE-81上）所需的酶量

酶活性分析混合物：40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM碱性变性的牛胸腺DNA

保存缓冲液组分：20mM 磷酸钾(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油

10×反应缓冲液：400mM Tris-HCL(PH7.5，25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT

抑制剂：金属螯合剂，修饰试剂（无水醋酸和N-乙基顺丁烯二可使3'→5' 外切核酸酶失活，但不影响聚合酶活性

失活：70℃加热10分钟

质量控制：测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染

备注：反应体系中ATP的浓度取决于连接反应的类型，推荐的BSA反应浓度是0.1mg/ml

性状：重组酶，催化ATP依赖的分子内和分子间磷酸二酯键连接（5'-磷酸基团和3'-羟基末端），底物分子为多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA，分子之间的小的连接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子内连接的小底物是8个碱基的寡核苷酸。配套提供反应缓冲液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羟基末端连接。作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸。随酶提供10X 反应缓冲液

用途：生化研究

4-(4-偶氮)-1... 4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol 5290-62-0 10G 通用试剂  大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA检测试剂盒Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAkit 96T/48T

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