产品参数:
产品名称
规格
货号
植物中钙浓度
2g鲜重或0.3g干重
BJ-S0314
样品制备:公司产品仅用于科研
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (通过过滤)。
4 ). 通过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
优点如下:
1、操作简便:可将试剂混合成单试剂操作,全程约50分钟,可测48例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放12个月有效,试剂配制后至少能存放6个月;呈色稳定,显色后24小时吸光度不变。
3、再现性好:批内CV=2.3%,批间CV=5.34%。
4、回收试验: X =101.8%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、适用于细胞样本。
操作方法:
标准曲线的绘制
以组织样本为例,参照组织样本检测方法,取5个离心管,按下表加入下列试剂:
混匀后,每管加1mL双蒸水,快速混匀,置于沸水浴中煮沸50min,快速放至冰水中冷却,3000r/min、4℃离心15min,取上清于532nm读数。
样本检测
血清以及细胞培养上清:
取0.25mL样品加入到1.5mL试剂C溶液中,混匀后,加入0.3mL试剂D,混匀后于沸水浴中煮沸40min,快速放入冰水中冷却,3000r/min、4℃离心15min,取上清于532nm读数。
组织匀浆液
取0.2mL匀浆上清液,加入0.2mL试剂B,混匀后加入1.5mL试剂C和1.5mL试剂D,混匀,每管加入1mL双蒸水,快速混匀。沸水浴中煮沸50min,快速放入冰水中冷却,3000r/min、4℃离心15min,取上清于532nm读数。
培养细胞样本
取0.2mL细胞裂解液,加入1.5mL试剂C和1.5mL试剂D,混匀,每管加入1mL双蒸水,快速混匀。沸水浴中煮沸50min,快速放入冰水中冷却,3000r/min、4℃离心15min,取上清于532nm读数。
植物中钙浓度结果判断
以标准品含量作为横坐标,OD值作为纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
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