产品名称:(HPIV-2)人副流感病毒2型RT-LAMP试剂盒
英文名称:Human
Parainfluenza Virus 2
规格:
50次
货号:BJ-01P1454
产品运输:低温运输
产品保存:常温
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。公司产品仅用于科研
组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条
4 样品稀释液 6ml×1瓶
5 显色剂A液 6ml×1瓶
6 显色剂B液 6ml×1/瓶
7 终止液 6ml×1瓶
8 标准品 0.5ml×1瓶
9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2张
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
中文名称 方法 规格 prasterone
sulfate 中文名:去氢表雄酮硫酸钠盐 分子式:C19H27NaO5S
中文名称 方法 规格
Phyllostine 中文名: 分子式:C7H6O4
中文名称 方法 规格
N-Benzoyl-(2R,3S)-3-phenylisoserine
132201-33-3 中文名: 分子式:C16H15NO4 度:98.0% 关键词:
中文名称 方法 规格 Manidipine
di 中文名:盐酸马尼地平 分子式:C35H40Cl2N4O6
中文名称 方法 规格
Convallatoxin 508-75-8 中文名:铃兰毒苷 分子式:C29H42O10
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 中文名:1,3-双(4,5-二氢-2-恶唑)苯 分子式:C12H12N2O2 小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)
1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose 中文名: 分子式:C9H16O6 小鼠组织多肽抗原(mouse TPA)
1,2-Cyclohexanedicarboximide 中文名: 分子式:O2 小鼠血小板**素(mouse TPO)
1,2-Bis(phenylthio)ethane 中文名:1,2-双(苯硫基)乙烷 分子式:C14H14S2 小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体(mouse AIL/APO 2L)
1,2-Bis(3-indenyl)ethane 中文名:1,2-双(3-茚基)乙烷 分子式:C20H18 小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(mouse AIL R1)
5950/12/9
Piperlonguminine 25mg Thallus laminariae昆布LAMP鉴定试剂盒
5950/12/9 Piperlonguminine 50mg
Thallus laminariae昆布LAMP鉴定试剂盒
5950/12/9 Piperlonguminine 5mg
Semen raphani莱菔子LAMP鉴定试剂盒
5960/12/3 Cyclohexanoyl Coenzyme A 10mg
Semen armeniacae amarum苦杏仁LAMP鉴定试剂盒
5960/12/3 Cyclohexanoyl Coenzyme A 1mg
Flos farfarae款冬花LAMP鉴定试剂盒
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.(HPIV-2)人副流感病毒2型RT-LAMP试剂盒调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
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