旋覆花探针法PCR鉴定试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：常温

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。公司产品仅用于科研

组成

1 30倍浓缩洗涤液      20ml×1瓶

2 酶标试剂                 6ml×1瓶

3 酶标包被板              12孔×8条

4 样品稀释液              6ml×1瓶

5 显色剂A液               6ml×1瓶  

6 显色剂B液               6ml×1/瓶  

7 终止液                     6ml×1瓶

8 标准品                     0.5ml×1瓶

9 标准品稀释液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2张

服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

N-乙酰-DL-甲硫氨酸  N-Acetyl-DL-mine  质量规格：0.99 人α羟基脱氢酶(αHBDH)ELISA检测试剂盒Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit 96T/48T

DL-高半胱氨酸  DL-Homocysteine   质量规格：0.95 大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)试剂盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit

间氟-DL-酪氨酸  m-Fluoro-DL-tyrosine   质量规格：0.99 英文名称RatFree-TestoteroneELISAKit大鼠游离睾同(Free-Testoterone)规格：96T/48T

钙蛋白酶抑制剂I(进口)  Calpain Inhibitor I(ALLN)   质量规格：≥95%,美国进口 革兰氏阳性基因组DNA化试剂盒20

DL-丙氨酰-DL-丙氨酸  DL-Ala-DL-Ala  质量规格：0.97 ELISAKitHBxAg人乙型肝炎病毒X抗原规格：48T/96T

DL-丙氨酰-DL-正缬氨酸  DL-Alanyl-DL-norvaline  质量规格：0.99 小鼠金属硫蛋白1(MT-1)ELISA试剂盒 ，英文名： MT-1 ELISA Kit

3-(1-萘基)-L-丙氨酸  3-(1-Naphthyl)-L-alanine  质量规格：>98%,BR 大鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA检测试剂盒RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 96T/48T

Fmoc-3-(2-萘基）-D-丙氨酸  Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine  质量规格：0.98 人促胰液素/分泌素受体(SR)试剂盒 Human secretin receptor,SR ELISA Kit

L-瓜氨酸  L-Citrulline   质量规格：>99%,BR RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fmoc-L-瓜氨酸  Fmoc-L-Citrulline  质量规格：>98%,BR HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
小鼠内皮细胞生长因子受体1   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor receptor 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-R1  Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  32249-35-7  中文名：  分子式：C7H10O3 

小鼠内皮细胞生长因子D(mouse VEGF-D)     Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  114772-38-2  中文名：  分子式：C15H13BrO2  度：98.0%  关键词： 

小鼠内皮细胞生长因子D   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor D   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-D  Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  32249-35-7  中文名：  分子式：C7H10O3  度：98.0%  关键词：  

小鼠内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H14O2  度：98.0%

小鼠内皮细胞生长因子C(mouse VEGF-C)     Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H13BrO2
103628-48-4  Sumatriptan Succinate  100mg  Rhizoma pinelliae preparatum法半夏PCR鉴定试剂盒 

103-63-9  Phenethylbromide  1mg  Rhizoma pinelliae preparatum法半夏PCR鉴定试剂盒 

103-63-9  Phenethylbromide  5mg  Catechu儿茶PCR鉴定试剂盒 

103639-04-9  Ondansetron hydrochloride dihydrate  10mg  Catechu儿茶PCR鉴定试剂盒 

103639-04-9  Ondansetron hydrochloride dihydrate  10mM(in1mLDMSO)  Rhizoma curcumae莪术PCR鉴定试剂盒

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

旋覆花探针法PCR鉴定试剂盒加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

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