款冬花探针法PCR鉴定试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：常温

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。公司产品仅用于科研

组成

1 30倍浓缩洗涤液      20ml×1瓶

2 酶标试剂                 6ml×1瓶

3 酶标包被板              12孔×8条

4 样品稀释液              6ml×1瓶

5 显色剂A液               6ml×1瓶  

6 显色剂B液               6ml×1/瓶  

7 终止液                     6ml×1瓶

8 标准品                     0.5ml×1瓶

9 标准品稀释液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2张

服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

1-甲基萘  1-(Bromomethyl)naphthalene  质量规格：>99% ELISAKitHB-β人血红蛋白β亚基规格：48T/96T

R-联萘酚酯  (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate  质量规格：>99% 小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA试剂盒 ，英文名： Melanoma ELISA Kit

2,6-二氯嘌呤  2,6-Dichloropurine  质量规格：>97%,原装进口 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA检测试剂盒RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 96T/48T

2,4-二氯喹唑啉  2,4-Dichloroquinazoline  质量规格：>98% 人并殖吸虫抗体(IgM)试剂盒 Human Ai-Paragonimus aibody IgM ELISA kit

9-氯甲基蒽  9-(Chloromethyl)anthracene  质量规格：>98%，进口原装 RatoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

阿魏酸乙酯（标准品）  Ethyl ferulate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 Michel固着液50毫升

CAPS; 3-(环已胺)丙磺酸  CAPS  质量规格：>99% PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISA试剂盒猪表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

巴豆苷（标准品）  Crotonoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠核转录因子kBP65(NFkBP65)ELISA试剂盒 ，英文名： NFkBP65 ELISA Kit

巴西苏木素（标准品）  Brazilin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA检测试剂盒RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T

菝葜皂苷元（标准品）  Sarsasapogenin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人并殖吸虫抗体(IgG)试剂盒 Human Ai-Paragonimus aibody IgG ELISA kit
小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Naproxen  22204-53-1  中文名：萘普生  分子式：C14H14O3 

小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Nandrolone decanoate  中文名：癸酸诺龙  分子式：C28H44O3  度：98.0%

小鼠载脂蛋白E   英文名称：   Mouse Apolipoprotein E   规格：   48T/96T   英文缩写：   ApoE  Esomeprazole   161796-78-7  中文名：埃索美拉唑钠  分子式：C17H19N3NaO3S 

小鼠载脂蛋白B   英文名称：   Mouse Apolipoprotein B   规格：   48T/96T   英文缩写：   Apo-B  Esomeprazole   161796-78-7  中文名：埃索美拉唑钠  分子式：C17H19N3NaO3S  度：98.0%  关键词： 

小鼠载脂蛋白AI   英文名称：   Mouse Apolipoprotein AI   规格：   48T/96T   英文缩写：   Apo-AI  Esomeprazole   中文名：埃索美拉唑钠  分子式：C17H19N3NaO3S
102130-84-7  Nemadectin  5mg  Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鉴定试剂盒 

10213-78-2  Stearyldiethanolamine  100mg  Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鉴定试剂盒 

10213-78-2  Stearyldiethanolamine  10mM*1mLinDMSO  Radix saposhnikoviae防风染料法PCR鉴定试剂盒 

1021418-53-0  RJR 2429 dihydrochloride  10mg  Radix saposhnikoviae防风染料法PCR鉴定试剂盒 

1021418-53-0  RJR 2429 dihydrochloride  50mg  Folium sennae 番泻叶染料法PCR鉴定试剂盒

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

款冬花探针法PCR鉴定试剂盒DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

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