草乌探针法PCR鉴定试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：常温

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。公司产品仅用于科研

组成

1 30倍浓缩洗涤液      20ml×1瓶

2 酶标试剂                 6ml×1瓶

3 酶标包被板              12孔×8条

4 样品稀释液              6ml×1瓶

5 显色剂A液               6ml×1瓶  

6 显色剂B液               6ml×1/瓶  

7 终止液                     6ml×1瓶

8 标准品                     0.5ml×1瓶

9 标准品稀释液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2张

服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

香荆芥酚（标准品）  5-Isopropyl-2-methylphenol  质量规格：供含量测定用 英文名称Mouset-PAELISAKit小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)规格：96T/48T

十七碳酸甲酯（标准品）  METHYL HEPTADECANOATE  质量规格：内标 pBADCE4.1+目的基因双基因真核表达

鸭脚树叶碱（标准品）  2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester  质量规格：含量测定 PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA试剂盒猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6-羟基-7-甲氧基（标准品）  6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN  质量规格：含量测定 小鼠钙网蛋白(C)ELISA试剂盒 ，英文名： C ELISA Kit

苦玄参苷IA（标准品）  PIEFELTARRAENIN A  质量规格：含量测定 人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA检测试剂盒HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 96T/48T

番茄碱（标准品）  Tomatidine  质量规格：HPLC≥98%,标准品 大鼠腺原氨酸(T3)抗体试剂盒 Rat i-iodothyronine(T3)aibody ELISA kit

樟脑（标准品）  (-)-CAMPHOR  质量规格：含量测定 英文名称RatTATELISAKit大鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)规格：96T/48T

11-羰基-β-乙酰乳香酸（标准品）  3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID  质量规格：含量测定 活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级绿色荧光测定试剂盒40/100

3',4',5',5,7-五甲氧基黄酮（标准品）  3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE  质量规格：含量测定 ELISAKitCYP21B人细胞色素P450c21B/21-羟化酶规格：48T/96T

金橙II（标准品）  OrangeΙΙ  质量规格：检查 小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA试剂盒 ，英文名： CCB ELISA Kit
猪雌二醇(E2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Strontium ranelate  135459-87-9  中文名：雷尼酸锶  分子式：C12H10N2O8S 

猪传染性胃肠炎病毒抗体elisa试剂盒   猪传染性胃肠炎病毒抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   猪传染性胃肠炎病毒抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪传染性胃肠炎病毒抗体试剂盒、猪传染性胃肠炎病毒抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Taurocholic acid  81-24-3  中文名：牛磺胆酸  分子式：C26H45NO7S 

猪传染性胃肠炎病毒抗体（TGEV）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Tauroursodeoxycholic acid  14605-22-2  中文名：牛磺熊去氧胆酸  分子式：C26H45NO6S 

猪传染性胃肠炎病毒抗体(TGEV)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tenofovir  147127-20-6  中文名：泰诺福韦  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  关键词： 

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T  Shiraiachrome A  中文名：  分子式：C30H26O10
100828-16-8  (RS)-CPP  10mg  Rhizoma chuanxiong川芎探针法PCR鉴定试剂盒 

100828-16-8  (RS)-CPP  50mg  Herba andrographis穿心莲探针法PCR鉴定试剂盒 

100-83-4  3-Hydroxybenzaldehyde  100mg  Herba andrographis穿心莲探针法PCR鉴定试剂盒 

100845-83-8  SQ28603 (SQ28,603)  10mg  Radix cyathulae川牛膝探针法PCR鉴定试剂盒 

100845-83-8  SQ28603 (SQ28,603)  1mg  Squama manis穿山甲探针法PCR鉴定试剂盒

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

草乌探针法PCR鉴定试剂盒视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

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