半枝莲探针法PCR鉴定试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：常温

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。公司产品仅用于科研

组成

1 30倍浓缩洗涤液      20ml×1瓶

2 酶标试剂                 6ml×1瓶

3 酶标包被板              12孔×8条

4 样品稀释液              6ml×1瓶

5 显色剂A液               6ml×1瓶  

6 显色剂B液               6ml×1/瓶  

7 终止液                     6ml×1瓶

8 标准品                     0.5ml×1瓶

9 标准品稀释液           1.5ml×1瓶

10 封板膜                   2张

服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

降钙素，人  Calcitonin, human  质量规格：>95%,BR 人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA检测试剂盒HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 96T/48T

降钙素，大鼠  Calcitonin, rat  质量规格：>95%,BR 大鼠热休克蛋白90-alpha(Hsp90aa1/Hsp86/Hspca)试剂盒 Rat Heat shock protein HSP 90-alpha,Hsp90aa1/Hsp86/Hspca ELISA kit

降钙素基因相关肽（8-37），人  Calcitonin Gene Related Peptide (8-37), human  质量规格：>95%,BR 英文名称RatET-1Elisakit大鼠内皮素1(ET-1)Elisakit规格：96T/48T

降钙素基因相关肽Ⅱ，人  Calcitonin Gene RelatedPeptide II, human  质量规格：>95%,BR 基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒60

降钙素基因相关肽，大鼠  Calcitonin Gene RelatedPeptide, rat  质量规格：>95%,BR ELISAKitCDC人细胞分裂周期基因规格：48T/96T

蛋白酶1底物2m，荧光  Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic; Ac-YVAD-AMC  质量规格：>95%,BR 小鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)ELISA试剂盒 ，英文名： SFRP2 ELISA Kit

蛋白酶3底物1m，荧光  Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC  质量规格：>95%,BR 人抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)ELISA检测试剂盒Humansmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit 96T/48T

肽B;天蚕丝肽  Cecropin B  质量规格：>95%,BR 大鼠热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒 Rat heat shock protein 70,hSP-70 ELISA Kit

卡律蝎  Charybdotoxin  质量规格：>95%,BR 英文名称RatEndothelin-1ELISAKit大鼠内皮素(ET-1)规格：96T/48T

促皮质素释放因子，绵羊  Corticotropin Releasing Factor,ovine  质量规格：>95%,BR 基因拼接图谱完全分析技术试剂盒5
猪紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Sennoside B  中文名：番泻苷B  分子式：C42H38O20  度：95.5%

猪紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Soyacerebroside II  中文名：大豆脑苷II  分子式：C40H75NO9 

猪假血友病因子elisa试剂盒   猪假血友病因子试剂盒   规格型号：96T/48T     Sennoside A  中文名：番泻苷A  分子式：C42H38O20 

猪辛型肝炎病毒（TTV）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Sennoside B  中文名：番泻苷B  分子式：C42H38O20 

猪心肌肌钙蛋白Ⅰelisa试剂盒   猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒   规格型号：96T/48T   猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒，  Sennoside A  81-27-6  中文名：番泻苷A  分子式：C42H38O20  度：92.0%  关键词：  泻药; 狭叶番泻叶; 蒽醌苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
1006036-88-9  MK-2894 sodium salt  50mg  Radix stephaniae tetrandrae防已探针法PCR鉴定试剂盒 

1006036-88-9  MK-2894 sodium salt  5mg  Semen torreyae榧子探针法PCR鉴定试剂盒 

1006378-90-0  p38 MAPK-IN-1  100mg  Rhizoma pinelliae preparatum法半夏探针法PCR鉴定试剂盒 

1006378-90-0  p38 MAPK-IN-1  10mg  Folium sennae 番泻叶探针法PCR鉴定试剂盒 

1006378-90-0  p38 MAPK-IN-1  10mM*1mLinDMSO  Folium sennae 番泻叶探针法PCR鉴定试剂盒

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

半枝莲探针法PCR鉴定试剂盒视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

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