注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液���配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 阿菲波菌属通用PCR检测试剂盒原理
英文名称: Afipia spp.PCR
产品货号: BJ-R013240
产品规格: 50T
产品分类: PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2阿菲波菌属通用PCR检测试剂盒原理.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
Sulfamonomethoxine 38006-08-5 中文名:磺胺间甲氧嘧啶钠 分子式:C11H11N4NaO3S 度:98.0% 小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit
Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺间甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 度:98.0% 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)PCR检测试剂盒
Sulfamethoxazole 723-46-6 中文名:磺胺甲噁唑 分子式:C10H11N3O3S 度:98.0% 关键词: 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)PCR检测试剂盒
Sulfamethazine 57-68-1 中文名:磺胺二甲嘧啶 分子式:C12H14N4O2S 度:99.0% 小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)PCR检测试剂盒
Sulfaguanidine 57-67-0 中文名:磺胺脒 分子式:C7H10N4O2S 度:99.0% 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)PCR检测试剂盒
Ophthalmic
Acid R 396 (Tyr5,D-Trp6•8•9,Lys-NH210)-Neurokinin A
(4-10) Neuromedin U-25(porcine) Magainin I
BIBP3226 Neuropeptide Y (1-24) amide (human, rat) Acetyl-(Leu28•31)-Neuropeptide Y (24- 36),Acetyl-(Leu28•3 (D-Trp11)-Neurotensin Magainin II
Neuropeptide Y
(human,rat) (Cys2)-Neuropeptide Y
(1-4)-8-aminooctanoyl-(D-Cys27)- Neuro
Tyr-Lys-Gly-(Cyclo(Glu26- Lys29),Pro34)-Neuropeptide Y (25-3 (D-Tyr11)-Neurotensin DABCYL-Glu-Arg-Nle-Phe-Leu-Ser-Phe-Pro-EDANS
Biotinyl-Neuropeptide
Y(human, rat) Neuropeptide Y (2-36)
(human, rat)
(D-Tyr27•36,D-Thr32)-Neuropeptide Y (27-36) Neurotensin (1-6) H(-EENV)6-OH
Neuropeptide Y
(freeacid) (human, rat) Neuropeptide Y
(2-36) (porcine) ((Cys31,Nva34)-Neuropeptide
Y (27-36))2 Neurotensin (1-8) VTCG
人Apelin蛋白(APLN)PCR检测试剂盒
别称:APEL, XNPEP2 Human APLN(Apelin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组APLN浓度。
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