注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 交链孢霉属通用PCR检测试剂盒实验步骤
英文名称: Alternaria
spp.PCR
产品货号: BJ-R013251
产品规格: 50T
产品分类: PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
交链孢霉属通用PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
Tenacigenin B 中文名: 分子式:C21H32O5 脂多糖 10mg
Temozolomide 中文名:替莫唑胺 分子式:C6H6N6O2 Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5
Telmisartan
tert-butyl ester 中文名: 分子式:C37H38N4O2 L-异亮酸 10g
Telmisartan 中文名:替米沙坦 分子式:C33H30N4O2 L-Isoleucine 50g
Tegafur 中文名:替加氟 分子式:C8H9FN2O3 脂肪酶(LPS)试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
Leucokinin IV SIKVAV
Ac-Phe-Arg-OEt
Entero-Kassinin Acetyl-Hirudin
(55-65)(sulfated)
Leucokinin
III Laminin α -1 Chain (2722-2729)
(mouse) Neo-Kyotorphin Kassinin
Hirudin (55-65)(sulfated)
Leucokinin II Cys-Laminin A chain (2091-2108) c(D-Arg2)-Kyotorphin AF11377
Acetyl-Hirudin (55-65)(desulfated)
Leucokinin I Laminin Fragment (925-933) Amide Kisspeptin-54 (human) IL-1 Receptor Peptide (human) Acetyl-Hirudin (54-65) (sulfated)
Leptin (150-167)
(human) Laminin β -1 Chain (925-933)
(human, mouse) Kisspeptin-13
(4-13)(human) IL-8
Inhibitor,Antileukinate Hirudin
(54-65)(sulfated)
人C肽(C-P)PCR检测试剂盒
别称:Connecting Peptide Human C-P(C-Peptide)
ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组C-P浓度
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