注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 构巢曲霉PCR检测试剂盒说明书
英文名称: Aspergillus
nidulansPCR
产品货号: BJ-R013274
产品规格: 50T
产品分类: PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
构巢曲霉PCR检测试剂盒说明书2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
Tiotropium
bromide 中文名:噻托溴铵 分子式:C19H22NO4S2 载脂蛋白A-I(ApoA-I)测定试剂盒(比浊法)
Tinidazole 中文名:替硝唑 分子式:C8H13N3O4S 铜(Cu)测定试剂盒(络合比色法)
Timosaponin
B-II 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19 α-岩藻糖苷酶(AFU)测定试剂盒(速率法)
Timosaponin
AIII 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 载脂蛋白D 英文名称: Human Apolipoprotein D 规格: 48T/96T 英文缩写:
ApoD
Tigogenin 中文名:剑麻皂素 分子式:C27H44O3 载脂蛋白M 英文名称: Human Apolipoprotein M 规格: 48T/96T 英文缩写:
ApoM
(Lys7)-Dermorphin Defensin HNP-3 (human),Human Neutrophil
Peptide-3, HNP-3 GGH Ac-Tle-Tle-Asn(Me)2-Ala- AMC Cortistatin-14 (mouse,rat),(Des-
Ala1,Pro2,Ser12)- Somatosta
(Phe4)-Dermorphin
(1-4)amide Defensin HNP-2 (human), Human Neutrophil Peptide-2, HNP-2
DAHK
Abz-Tle-Tle-Asn(Me)2-ASSRL-3-nitro-Tyr-Arg-OH Astressin
(D-Arg2,Lys4)-Dermorphin(1-4)
amide Defensin HNP-1 (human), Human Neutrophil Peptide-1, HNP-1
Ac-HHGH (Tyr0)-C-Type Natriuretic
Peptide (32-53) (human, porcine, r α -Helical CRF (12-41)
(D-Arg2,Sar4)-Dermorphin
(1-4) (Gly106)-Cytochrome C(92-107)
(Manduca sexta)
(Tyr0,Gln1)-Pol-Rfamide C-Type
Natriuretic Peptide (32-53) (human, porcine, rat) (D-Phe12,Nle21•38,α -Me-Leu37)-CRF
(12-41)(human, rat)
Dermorphin Cytochrome C (88-104)(domestic pigeon) Pol-Rfamide
C-Type Natriuretic Peptide (1-53) (human),CNP-53 (human) Boc-MLF
人S100钙结合蛋白B(S100B)PCR检测试剂盒
别称:S100-B, NEF, S100Beta Human S100B(S100
Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组S100B浓度
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