注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 牛诺如病毒PCR检测试剂盒说明书
英文名称: Bovine Norovirus(BoNoV)RTPCR
产品货号: BJ-R013382
产品规格: 50T
产品分类: PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
牛诺如病毒PCR检测试剂盒说明书组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
基质金属蛋白酶抑制因子 -2(TIMP-2) 作用: ELISA 规格:
96T 美国 R&D Rosuvastain
Calcium 147098-20-2 中文名:瑞舒伐他汀钙 分子式:C22H28FN3O6S
基质金属蛋白酶抑制因子 -1(TIMP-1) 作用: ELISA 规格:
96T 美国 R&D Rosuvastain Calcium 147098-20-2 中文名:瑞舒伐他汀钙 分子式:C22H28FN3O6S 度:98.0% 关键词:
基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1) 96T/48T Ornidazole 16773-42-5 中文名:奥硝唑 分子式:C7H10ClN3O3
基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 96T/48T Ornidazole
16773-42-5 中文名:奥硝唑 分子式:C7H10ClN3O3 度:98.0% 关键词:
基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Trazodone 25332-39-2 中文名:盐酸曲唑酮 分子式:C19H23Cl2N5O
RSAI 1,000U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
RSAI 5,000U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
SACI 1,200U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
SACI 5x1,200U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
SACI 2,000U (10U/ul) 限制性内切酶和克隆酶
人补体iC3b(iC3b)PCR检测试剂盒 别称:iC3b Human iC3b(Complement iC3b) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组iC3b浓度
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