注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 猪札如病毒札幌病毒PCR检测试剂盒实验步骤
英文名称: Porcine Sapovirus(PoSaV)()RTPCR
产品货号: BJ-R014063
产品规格: 50T
产品分类: PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
猪札如病毒札幌病毒PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
小鼠脱氧酚PCR检测试剂盒 小鼠脱氧酚试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠脱氧酚试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:PCR检测试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠脱氧酚试剂盒、小鼠脱氧酚eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
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Loratadine 中文名:氯雷他定 分子式:C22H23ClN2O2
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小鼠脱氢酶E1(PDHE1)ELISAKit Cholesterol 57-88-5 中文名:胆固醇 分子式:C27H46O 度:98.0% 关键词:
Pramipexole
di 104632-25-9 中文名:盐酸普拉克索 分子式:C10H19Cl2N3S
CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β内啡肽规格:48T/96T
N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide 147200-03-1 中文名: 分子式:C10H14N2O5S3 样品二维电泳裂解液用于蛋白二维电泳
1,5-Pentanediol
diacrylate 36840-85-4 中文名: 分子式:C11H16O4 RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Atracurium
oxalate 64228-78-0 中文名:阿曲库胺草酸盐 分子式:C53H68N2O16 豚鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Lurasidone 367514-87-2 中文名:鲁拉西酮 分子式:C28H36N4O2S
Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒
水牛角粉 Water buffalo hornpowder 1g
5-羟基色安醋5-5-xy7noxyyptophcn26-69-9HPLC≥98%,20mg/vial
常春藤苷C Hederacoside C 14216-03-6
HPLC≥98% 5mg/支
含量测定头孢呋辛酯13℃,避光200mg
去氢钩藤碱;柯诺辛因碱 corynoxeine 1630-94-4;630-94-4 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
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