无乳链球菌PCR检测试剂盒实验步骤

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

无乳链球菌PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

植物总酚测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Tropisetron   中文名：盐酸托烷司琼  分子式：C17H21ClN2O2 

植物总RNA提取试剂盒   Pla total RNA Exaction Kit                 Riligustilide  89354-45-0  中文名：  分子式：C24H28O4 

植物蔗糖含量试剂盒   可见分光光度法    50管/48样  Trehalose  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11  度：98.0%

植物原测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Tropisetron   105826-92-4  中文名：盐酸托烷司琼  分子式：C17H21ClN2O2  度：98.0%  关键词： 

植物玉米素核苷(ZR)PCR检测试剂盒     Testosterone acetate  1045-69-8  中文名：醋酸  分子式：C21H30O3  度：98.0%  关键词：

6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2    乙酰L-肉碱盐酸盐   100g

6-O-Methylcerevisterol  中文名：  分子式：C29H48O3    Acetyl-L-carnitinehydrochlorid

6-O-Feruloylglucose  中文名：6-O-阿魏酰葡萄糖  分子式：C16H20O9    橙   1g

6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose  中文名：6-O-对羟基苯甲酰葡萄糖  分子式：C13H16O8    AcridineOrange,hemi(zincchloride)salt   10g              

6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O2    乙肟   500ml

鹧鸪菜 Tanaka 1g

四轻姜皇速Fourxy7nogencurcumin3606-4-120mg

StigMasta-5,8-dien-3-ol STIGMASTA-5,8-DIEN-3-OL 570-72-9

鸢尾黄素548-77-6Tectorigenin

远志酸 Polygalacic acid 22338-71-2 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

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