注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应���间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称
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文氏密螺旋体PCR检测试剂盒实验步骤
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英文名称
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Treponema vincentiiPCR
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货号
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BJ-R014287
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
文氏密螺旋体PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
猪褪黑素(MT/MLT)PCR检测试剂盒 Sibiricose
A1 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15
猪透明质酸PCR检测试剂盒 猪透明质酸试剂盒 规格型号:96T/48T 猪透明质酸试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:PCR检测试剂盒(进口分装),产品别名:猪透明质酸试剂盒、猪透明质酸PCR检测试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Silodosin 中文名:西洛多辛 分子式:C25H32F3N3O4 度:98.0%
猪透明质酸(HA)PCR检测试剂盒 Sibiricose A1 139726-40-2 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15 度:97.0% 关键词:
猪透明质酸(HA)ELISAKit Senkyunolide G 中文名:洋川芎内酯G 分子式:C12H16O3
猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Roflumilast
162401-32-3 中文名:罗氟司特 分子式:C17H14Cl2F2N2O3 度:98.0% 关键词:
1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C31H38O18 度:98.0% 兔子内皮抑素(ES)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Sibiricose A1 中文名:6'-芥子酰基蔗糖 分子式:C23H32O15 度:97.0% 兔子内皮素1(ET-1)ELISAKit
ELISA. 96T/48T
Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate 中文名: 分子式:C20H34O3 度:% 兔子球蛋白G(IgG)ELISAKit ELISA.
96T/48T
(-)-Phaselic
acid 中文名: 分子式:C13H12O8 度:98.0% 兔子球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Ethyl
(9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 中文名: 分子式:C20H36O3 度:97.0% 兔子球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
辛酰己酰聚氧甘油酯标准品 200mg
Tolypocladium
inflatum Gams. 环孢菌素A 59865-13-3 C62H111N11O12 ≥98% 乳果糖:用于系统适用性试验(Y0000188
奥美拉唑相关FG混合物标准品25mg
Tylosin Tarate 泰洛星标准品1405-54-5 100mg泰洛星标准品
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