黄热病病毒PCR检测试剂盒实验步骤

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

参数规格：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

黄热病病毒PCR检测试剂盒实验步骤3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

中文名称   方法   规格  Alogliptin  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2  度：98.0%

中文名称   方法   规格  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8  度：98.0%

中文名称   方法   规格  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2 

中文名称   方法   规格              Naftifine   65473-14-5  中文名：盐酸萘替芬  分子式：C21H22ClN 

中文名称   方法   规格              N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  1871-89-2  中文名：N,N'-双(2-羟乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4

谷氨酸单钠盐 HPLC≥98% 50mg 犬透明质酸酶3(HAase 3)试剂盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit

骨化二醇 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsRⅡ)规格：96T/48T

骨化二醇 HPLC≥98% 10mg 超氧化物歧化酶(SOD)活性酶动力比色法定量检测试剂盒(含标准样)50

瓜子金皂苷V HPLC≥95% 20mg RatgranzymesA,Gzms-AELISA试剂盒大鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

瓜子金皂苷己 HPLC≥98% 20mg 小鼠周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)ELISA试剂盒 ，英文名： CDKN2A ELISA Kit

关附甲素 HPLC≥98% 10mg 犬双氢(DHT)ELISA检测试剂盒CanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T

管花苷A HPLC≥98% 20mg 犬透明质酸酶2(HAase 2)试剂盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

光翠雀碱 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人肿瘤坏死因子β(TNFβ)规格：96T/48T

光萼野百合碱 HPLC≥98% 20mg 超氧化物歧化酶(SOD)酵母/裂解样品制备试剂盒50

光甘草定 HPLC≥98% 20mg RatgranzymesB,Gzms-BELISA试剂盒大鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鸭跖草 Commelina communis 0.5g

槲皮速-3-氧葡萄糖甙Quqrcqtinglucosidq-3-oxygqn1637-2-HPLC≥98%，20mg/vial

麦冬甲基黄烷同A metxylophiopogonanone A 74805-92-8 HPLC≥98% 20mg/支

含量测定培扶沙星13℃，避光100mg

羟基积雪草苷 Madecassoside 34540-22-2 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

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