登革热病毒PCR检测试剂盒实验步骤

参数规格：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

血小板膜糖蛋白 (GP IIb/IIIa)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Pentoxyverine   中文名：枸橼酸喷托维林  分子式：C26H39NO10  度：98.0%

血小板活化因子受体   英文名称：   Human Platelet Activating Factor Receptor   规格：   48T/96T   英文缩写：   PAFR  Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O  度：98.0%

血小板活化因子 (PAF)   作用：   ELISA   规格：   96T   原装进口  Pentagalloylglucose  中文名：五没食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26  度：98.0%

血小板活化因子   英文名称：   platelet active factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   PAF  Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  1808159-02-5  中文名：  分子式：C56H84O20 

血糖含量试剂盒   酶标法    50管/48样  4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  438056-69-0  中文名：  分子式：C10H12N2O2

三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg 犬基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

三七素 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanangiotensinogenELISAKit人血管紧张素原(aGT)规格：96T/48T

三七皂苷FC HPLC≥98% 20mg 化线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒20/200

三七皂苷Fe HPLC≥98% 20mg RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA试剂盒大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三七皂苷Ft HPLC≥98% 20mg 小鼠原钙黏素15(PCDH15)ELISA试剂盒 ，英文名： PCDH15 ELISA Kit

三七皂苷R HPLC≥98% 20mg 猴载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA检测试剂盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

三七皂苷R(R型) HPLC≥98% 20mg 犬基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒 Canine Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit

三七皂苷R(S型) HPLC≥90% 20mg 英文名称HumanAngiotensinIconveingenzymeELISAKit人血管紧张素I转化酶(ACE)规格：96T/48T

三七总皂苷 HPLC≥70% 20mg 化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒20

三十烷醇 GC≥98% 20mg RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羊奶奶叶 Yanggrandmaleaves 5.0g

水仙苷Narcissusglycoside604-80-820mg

AlpinuMisoflavone ALPINUMISOFLAVONE 34086-50-5

根皮苷60-81-1Phlorizin

紫菀酮 Shionone 10376-48-4 20mg HPLC≥98% 用于含量测定，药理科研

登革热病毒PCR检测试剂盒实验步骤注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

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