副猪嗜血杆菌定量PCR检测试剂盒原理

参数规格：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

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小鼠转酶/谷转酶(ALT/GPT)ELISAKit                 Ethyl β-D-fructofuranoside  1820-84-4  中文名：乙基-β-D-果糖苷  分子式：C8H16O6 

小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISAKit     Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  中文名：  分子式：C31H39O4PSi 

小鼠转化生长因子-β2(mouse TGF-β2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  N-Demethylricinine  中文名：  分子式：C7H6N2O2  度：98.0%

小鼠转化生长因子-β2   英文名称：   Ttansforming Growth Factor -β2   规格：   48T/96T   英文缩写：   TGF-β2  n-Butyl β-D-fructofuranoside  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6

小芸木素 HPLC≥98% 10mg 犬钩端螺旋体IgG(Leptospira)试剂盒 Canine Leptospira IgG ELISA Kit

缬草醚醛 HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanCyclinD3ELISAKit人细胞周期素D3(CyclinD3)规格：96T/48T

缬草三酯 HPLC≥98% 20mg 大豆样品处理试剂盒20

辛伐他汀 HPLC≥97.5% 20mg RatIerleukin2,IL-2ELISA试剂盒大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

辛弗林 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒 ，英文名： GC ELISA Kit

辛弗林盐酸盐 HPLC≥98% 20mg 小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA检测试剂盒Mouseosteonectin,ONELISAKit 96T/48T

辛辣内酯A HPLC≥98% 5mg 人间皮素(MSLN)试剂盒 Human Mesothelin,MSLN ELISA KIT

辛夷脂素 HPLC≥98% 20mg Ratapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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新橙皮苷 HPLC≥98% 20mg Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA试剂盒小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

野百合碱 315-22-0 抗专题 单响尾蛇毒蛋白;大叶猪尿青碱;农吉利甲素;农吉利碱

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鉴别缬安酸110874-200203常温，避光100mg

Cholestyramine Resin考来烯胺树脂标准品11041-12-6500mg

棉籽 cottonseed Gossypol-acetic acid 醋酸棉酚 12542-36-8 C30H30O8. C2H4O2 ≥98%

副猪嗜血杆菌定量PCR检测试剂盒原理注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

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