钩端螺旋体PCR检测试剂盒实验步骤

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

钩端螺旋体PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

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血根碱 HPLC≥98% 20mg 犬高迁移率族蛋白A2(HMGA-2)试剂盒 Canine high mobility group AT-hook 2,HMGA2 ELISA Kit

血竭素 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanCytochromoP450ELISAKIT人细胞色素P450规格：96T/48T

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亚麻酸乙酯 GC≥98% 20mg 组蛋白H3-T110酸化检测试剂盒10/20等

亚油酸 GC≥98% 0.2ml MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA试剂盒小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

野百合碱 Crotaline 分 子 量：326.3600 CAS编号：315-22-0 分子式：C16H23NO6 别　　名：单响尾蛇毒蛋白;大叶猪尿青碱;农吉利甲素 【性状】白色无定形粉末. 熔点197～198℃(分解)，比旋光度[α] = -54.7°(录仿);可溶于乙醇，易溶于录仿，微溶于本或水

假黄皮Clausena excavata Serratenediol 千层塔烯二醇，锯齿石松烯二醇，三芝烯二醇 2239-24-9 C30H50O2 吉马同(5 67

TLC法检查用双青胺100206-200302常温，避光50mg

辅酶 Q10杂质标准品303-97-9 15mg

沒食子酸Gallic acid metxyl 3,4,5- imetxoxybenzoate 3,4,5-氧基本甲酯 1916-07-0 C11H14O5 ≥98%

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