注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 人肥胖易感基因T PCR测定试剂盒原理
英文名称: 详见说明
产品货号: BJ-R014652
产品规格: 50T
产品分类: PCR荧光定量检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
人肥胖易感基因T PCR测定试剂盒原理组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
小鼠卵泡休止素 英文名称: Mouse
Follistatin 规格: 48T/96T 英文缩写: FST
N-Benzoyl-L-glutamic acid
6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5 度:98.0%
小鼠瘤病毒18(HPV-18)ELISA试剂盒
Bromhexine 611-75-6 中文名:盐酸溴己新 分子式:C14H21Br2ClN2
小鼠瘤病毒16(HPV-16)ELISA试剂盒
Brinzolamide 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 度:98.0%
小鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒 Febuxostat 中文名:非布索坦 分子式:C16H16N2O3S
小鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISAKit Falcarinol 中文名: 分子式:C17H24O
R人参皂苷Rg HPLC≥98% 20mg Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
三七素 HPLC≥98% 20mg
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA试剂盒鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格:96T/48T
齿孔酸; 齿孔菌酸 HPLC≥96.5% 20mg 载玻片细胞CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
马兜铃内酰胺A HPLC≥98% 20mg
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甲基条叶蓟素; 泽兰黄素 HPLC≥98% 20mg 小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 ,英文名: FN ELISA Kit
矢车菊黄素 HPLC≥98% 20mg 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA检测试剂盒Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit
96T/48T
凤仙萜四醇苷K HPLC≥98% 20mg 人黑色素瘤相关抗原D4(MAGED4/MAGED4B)试剂盒 Human
MAGED4/MAGED4B ELISA Kit
硝基喜树碱 HPLC≥97% 20mg
RatCyclin-D1ELISAKit大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
重楼皂苷E HPLC≥95% 20mg 3’末端RNA探针同位素([32P]pCp)连接酶标记试剂盒20
重楼皂苷F HPLC≥94% 20mg
MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA试剂盒小鼠脱氢表雄同酯(DHEA-S)ELISA试剂盒规格:96T/48T
益母草 Leonurus sibiricus Stachydrine
xy7nochloride 盐酸水苏碱 4136-37-2 C7H14NO2.Cl ≥98%
青蒿速cqmisinin20mg/支
光翠雀减 denudatine 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
对照品无味录霉素A晶型0417-8701检查
Delphinidin
3-sambubioside chloride飞燕草素-3-桑布双糖苷度:>98%
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