猪布氏杆菌PCR检测试剂盒实验步骤

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

参数规格：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

猪布氏杆菌PCR检测试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISAKit                 Fumaric acid  110-17-8  中文名：  分子式：C4H4O4 

小鼠肺表面活性物质相关蛋白A   英文名称：   Mouse Pulmonary surfacta associated protein type A   规格：   48T/96T   英文缩写：   SP-A  Benzyl L-(+)-mandelate  62173-99-3  中文名：L-(+)-扁桃酸苄酯  分子式：C15H14O3 

小鼠非肌性肌球蛋白重链9   英文名称：   nonMyosin Heavy Chain 9   规格：   48T/96T   英文缩写：   nonMYH9hc  Edaravone  89-25-8  中文名：依达拉奉  分子式：C10H10N2O 

小鼠防御素A2   英文名称：   Mouse Defensins A2   规格：   48T/96T   英文缩写：   DA2  Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸达比加群酯  分子式：C40H47N7O8S  度：98.0%  关键词： 

小鼠泛素蛋白elisa试剂盒   小鼠泛素蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠泛素蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠泛素蛋白试剂盒、小鼠泛素蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Cyproterone acetate  中文名：醋酸环丙氯地孕酮  分子式：C24H29ClO4

醋酸地塞米松  Dexamethasone Acetate  质量规格：>98%,BP,BR,可用于细胞培养 人谷胱甘肽还原酶(GR)试剂盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit

醋酸地塞米松（标准品）  Dexamethasone Acetate  质量规格：HPLC>98%,标准品 RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游离状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲氧苄啶  Trimethoprim  质量规格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于细胞培养 ANNEXINV-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒10/20

甲氧苄啶（标准品）  Trimethoprim  质量规格：HPLC>98%,标准品 MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

西维来司钠  Sivelestat    质量规格：含量大于98.5% 小鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 ，英文名： PLGF ELISA Kit

奈韦拉平  Nevirapine  质量规格：>99%,USP30,BR 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA检测试剂盒MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T

奈韦拉平（标准品）  Nevirapine  质量规格：HPLC>98%,标准品 人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)试剂盒 Human GSH-Px ELISA Kit

磺胺甲恶唑  Sulfamethoxazole(SMZ)  质量规格：>99.5%,AR Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

磺胺甲恶唑（标准品）  Sulfamethoxazole(SMZ)  质量规格：HPLC>99%,标准品 APATHY封片液10毫升

硫酸头孢匹罗  Cefpirome Sulfate  质量规格：>760μg/MG,BR  MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISA试剂盒小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羽叶白头树Garuga pinnata Reynorin 槲皮素-3-D-木糖甙 549-32-6 C20H18O11 ≥95%

蟾毒灵BufclinHPLC≥98%，20mg/支

(R型)人参皂苷Rg3 20(R)Ginsenoside Rg3 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

中药对照药材地耳草121468-200401TLC法鉴别

Sweroside獐芽菜苷度：98%

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