注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR ���应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称
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西尼罗河病毒(WNV)核酸试剂盒原理
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R014920
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
西尼罗河病毒(WNV)核酸试剂盒原理组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Aspergillon A
2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O 度:98.0% 关键词:
虾特定基因序列(FC)核酸检测试剂盒 48T
Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O
虾胺/酚 英文名称: Octopamine 规格:
48T/96T 英文缩写: OPM Aspartame
22839-47-0 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 度:98.0% 关键词:
细小病毒(PPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Artesunate
88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8 度:98.0% 关键词:
细小病毒(PPV)核酸检测试剂盒 48T
Artesunate 88495-63-0 中文名:青蒿琥酯 分子式:C19H28O8
氢二钠七水
phosphate, dibasic, heptahydrate 质量规格:>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
dATP溶液(100 mM) dATP 100 mM solution 质量规格:>97%,BR 小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA 试剂盒
癸酸钠
decanoate 质量规格:>99%,进分 Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1
beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒
琼脂糖(美仑电泳级) Agarose 质量规格:美仑,电泳级 Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
琼脂糖(Sigma)
Agarose 质量规格:Sigma原装 Human1,25-dihydroxyvitaminD3,DVD/DHVD3ELISA试剂盒人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物血凝素
Phytohemagglutinin 质量规格:BR /酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒10/20
6-糠基氨基嘌呤,激动素
Kinetin,6-Furfurylaminopurine 质量规格:>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B细胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸 EGTA, egtazic
acid 质量规格:>98%,分子生物学级 小鼠苹果酸脱氢酶(MDH)ELISA试剂盒 ,英文名: MDH ELISA Kit
无水二氢钠(分子生物学级) phosphate, monobasic, anhydrous 质量规格:>98.5%,分子生物学级 小鼠白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit
96T/48T
月桂酰基肌氨酸钠(分子生物学级) lauroyl sarcosine 质量规格:>95%,分子生物学级 人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)试剂盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
脑膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸检测试剂盒 48T 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 中文名:3-乙酰基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3
纳米二氧化钛 Ribavirin 36791-04-5 中文名:利巴韦林 分子式:C8H12N4O5
莫氏立克次体(RM)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T 3-Amino-3-phenylpropionic
acid 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2
膜联蛋白5 英文名称: Annexin
5 规格: 48T/96T 英文缩写:
ANXA-5 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 中文名: 分子式:C29H48O2
膜联蛋白2 英文名称: Annexin
2 规格: 48T/96T 英文缩写:
ANXA-2 Otophylloside B 中文名:青阳参苷B 分子式:C49H78O16
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