牛流行热病毒(BEFV)核酸试剂盒说明书

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

产品名称： 牛流行热病毒(BEFV)核酸试剂盒说明书

英文名称:  详见说明
产品货号： BJ-R014922

产品规格： 50T

产品分类： 荧光-PCR法

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

牛流行热病毒(BEFV)核酸试剂盒说明书组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

营养肉汤500毫升  2-Acetamidothiazole  2719-23-5  中文名：2-乙酰氨基噻唑  分子式：C5H6N2OS  度：99.0%  关键词： 

营养琼脂平板50个  2-Acetyl-3-ethylpyrazine  32974-92-8  中文名：2-乙酰基-3-乙基吡嗪  分子式：C8H10N2O  度：99.0%  关键词： 

印度墨负性染色试剂盒50次  2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  关键词： 

异化型盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次  2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone  2011-66-7  中文名：2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮  分子式：C13H9ClN2O3  度：98.0%  关键词： 

乙酰甲基原醇V-P检测试剂盒20次  2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone  2797-51-5  中文名：2-氨基-3-氯-1,4-萘醌  分子式：C10H6ClNO2  度：99.0%  关键词：

聚乙二醇8000  PEG 8000  质量规格：>99%,分子生物学级 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA检测试剂盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T

氯化锂(分子生物学级)  Lithium chloride  质量规格：>98% 人分泌成分(SC)试剂盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit

硫酸亚铁铵六水  Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate  质量规格：>99%,BR RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

红四氮唑  TTC,TTZ,Tetrazolium Red  质量规格：>98%,BR Chu’sN6完全培养基500毫升溶液/片剂

磺胺甲氧哒嗪  Sulfamethoxypyridazine  质量规格：>98%,BR Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA试剂盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒规格：96T/48T

磺胺甲氧哒嗪(标准品)  Sulfamethoxypyridazine  质量规格：分析标准品 小鼠皮质酮/肾上腺酮(CO)ELISA试剂盒 ，英文名： CO ELISA Kit

TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦盐酸盐  TCEP;   质量规格：>99%,BR 小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA检测试剂盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T

硫代硫酸钠五水(AR)   thiosulfate, pentahydrate  质量规格：>99%,AR 人肺炎支原体抗体(MP-Ab)试剂盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit

化钠(AR)   iodide  质量规格：>99.5%,AR RatLaminin,LNELISAKit大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

可溶性淀粉  Starch soluble  质量规格：BR Chymoypsin

绵羊球蛋白A   英文名称：   Immunoglobulin A   规格：   48T/96T   英文缩写：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

绵羊促卵泡**   英文名称：   Follicle Stimulating Hormone   规格：   48T/96T   英文缩写：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

绵羊白介素2(IL-2)ELISAKit                 Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒   规格型号：96T/48T   绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒、绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit     Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%

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