注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称: 麻风杆菌(ML)核酸试剂盒原理
英文名称: 详见说明
产品货号: BJ-R014976
产品规格: 50T
产品分类: 荧光-PCR法
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
麻风杆菌(ML)核酸试剂盒原理组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
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dipivoxil 142340-99-6 中文名:阿德福韦酯 分子式:C20H32N5O8P 度:98.0% 关键词:
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兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit Adefovir
106941-25-7 中文名:阿德福韦 分子式:C8H12N5O4P 度:98.0% 关键词:
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1-Methyl-aminomethyl naphthalene
14489-75-9 中文名: 分子式:C12H13N 度:98.0% 关键词:
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Adefovir dipivoxil
142340-99-6 中文名:阿德福韦酯 分子式:C20H32N5O8P
硬脂酸胆酯(>98%,BR) Cholesteryl stearate 质量规格:>98%,BR 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA检测试剂盒Mouseplateletfactor3,PF3ELISAKit
96T/48T
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dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit
铬粒(>99%,BR) Chromium granular 质量规格:>99%,BR
RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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DH5α钙转感受态10X200微升
氯化铬六水(>98%,BR) Chromium(III) chloride, hexahydrate 质量规格:>98%,BR
Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISA试剂盒小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate 质量规格:>98%,BR 小鼠内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
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酸性红B
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Lonidamine 中文名:氯尼达明 分子式:C15H10Cl2N2O2
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