禽流感/新城疫病毒(AIV/NDV)核酸试剂盒实验步骤

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研

参数规格：

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μl

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

     加ddH2O至               50 μl

     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

禽流感/新城疫病毒(AIV/NDV)核酸试剂盒实验步骤组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

兔基质金属蛋白酶-12(rabbit MMP-12)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5  度：95.0%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔基质金属蛋白酶-1(rabbit MMP-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  中文名：  分子式：C12H14N2O2  度：98.0%

兔基质金属蛋白酶 2   英文名称：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   MMP-2  5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S 

兔基质金属蛋白酶 1   英文名称：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   MMP-1  5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S  度：98.0%

兔基质金属蛋白9（MMP-9）ELISA试剂盒     4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  122475-42-7  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  关键词：

7-羟基-3-羧酸(>98.0%(HPLC))  7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid  质量规格：>98.0%(HPLC) Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒

7-二乙氨基-4-甲基(>98.0%(GC)(T))  7-Diethylamino-4-methylcoumarin  质量规格：>98.0%(GC)(T) Humanmyelinassociatedglycoproteinaoaibody,MAGELISAKit 人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

甲基钙黄绿素蓝水合物[用于配位滴定铜时的指示剂]  Methyl Calcein Blue Hydrate  质量规格：用于配位滴定铜时的指示剂 Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISA试剂盒人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6,7-亚甲二氧基-4-甲基-3-马来(>98.0%(HPLC)(N))  6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin  质量规格：>98.0%(HPLC)(N) 植物氨含量光谱法定量检测试剂盒20

4-甲基-6,7-亚甲基二氧代(>99.0 %(GC))  4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin  质量规格： >99.0 %(GC) Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit小鼠17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))  7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid  质量规格：>98.0%(GC)(T) 小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒 ，英文名： ENG/sCD105 ELISA Kit

溶剂绿 7(>85.0%(E))  Pyranin  质量规格：>85.0%(E) 大鼠维生素D2(VD2)ELISA检测试剂盒RatVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T

磺酰荧光素(>75.0%(HPLC)(T))  Sulfonfluorescein  质量规格：>75.0%(HPLC)(T) 人蛋白酪氨酸0酸酶自身抗体试剂盒 Human Tyrosine Phosphatase Aoaibodies ELISA Kit

N-琥珀基-7-羟基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))  N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate  质量规格：>95.0%(HPLC)(T) RatPeosidineELISAKit大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA试剂盒规格：96T/48T

N-琥珀基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N))  N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate  质量规格：>98.0%(HPLC)(N) GMS10甲基化基因电转感受态5X100微升

Human thymus leukemia aigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA试剂盒  (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-4-苄基-2-恶唑烷酮  分子式：C10H11NO2 

Human thymus independe aigen (TI-Ag) ELISA Kit 人胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)ELISA试剂盒  (R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-(-)-4-苄基-3-丙酰基-2-恶唑烷酮  分子式：C13H15NO3 

Human thymus expressed chemokine (TECK/CCL25) ELISA Kit 人胸腺表达趋化因子(TECK/CCL25)ELISA试剂盒  (R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  86695-06-9  中文名：(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO 

Human thymus depende aigen (TD-Ag) ELISA Kit 人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)ELISA试剂盒  (-)-Noe's Reagent  108031-79-4  中文名：(-)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3 

Human thymus activation regulated chemokine (TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化调节趋化因子(TAFA/CCL17)ELISA试剂盒  (2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol  90695-03-7  中文名：  分子式：C30H50O

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