操作步骤:
1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存
细胞冻存盒操作示意图:
细胞名称 WEHI-3 [WEHI3];小鼠血细胞
形态特性 圆形
生长特性 悬浮生长;部分细胞贴壁生长
特征特性 该细胞表达补体C3受体(C3R),产生溶菌酶、粒细胞集落刺激活性(CSA)、IL-3。4 ng/ml LPS可以抑制WEHI-3的生长,更高浓度可以阻断其生长;30~40 μg/ml右旋葡聚糖也可抑制其生长;可以吞噬乳胶颗粒,但无毒性;可吞噬酵母聚糖和BCG,并阻断该细胞的生长;该细胞仅表现出微弱的抗体依赖的细胞介导的细胞毒反应。鼠痘病毒阴性。
培养条件
DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
10%FBS
传代方法 细胞密度维持在2×105~ 2×106/ml,每2~3天换液1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
产品名称
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WEHI-3 [WEHI3];小鼠血细胞
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生长特性
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悬浮生长;部分细胞贴壁生长
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货号
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BJ-01X85218
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处理办法:
① 脱落的细胞进行离心收集,并在离心管中消化。
② 仍然贴壁的细胞,按照常规方法加入胰酶或其他解离剂消化。
③ 再将消化好的脱落细胞和贴壁细胞混合,按比例接种到新的培养器皿中。
放入培养箱静置2-4小时,若4小时后仍然没有伸展,延长静置时间。注意,过夜静置时,需倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松透气,保持气体交换(L15培养体系除外)。
操作步骤
1:从冰箱拿出无血清非程序冻存液,待用
2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
3:弃上清,加入适量无血清非程序冻存液,重悬细胞
4:按照1~1.5mL/管的量分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
5:将冻存管直接移入-80℃冰箱中,24h后转移至液氮长期保存
细胞冻存液操作示意图:
Hepa 1-6(小鼠肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0458U-118 MG(脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2 胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美(标准品)Dexamethasone质量规格:HPLC>98%,标准品
卵巢畸胎瘤细胞;PA-1盐酸地尔硫卓Diltiazem
HCL 质量规格:>98%,BR
NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸地尔硫卓(标准品)Diltiazem HCL 质量规格:含量测定,标准品
CL-0433RWPE-2(前列腺正常细胞)5×106cells/瓶×2地美司钠Dimesna 质量规格:美国进口
SL-7细胞,胚肺细胞 前列腺上皮细胞,RWPE2细胞 上皮细胞;MCF-10A甲磺酸多拉司琼Dolasetron mesylate 质量规格:>98.5%,BR吡嗪(>98.0%(GC)) Pyrazine 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称RatMyoglobinELISAKit大鼠肌红蛋白(MYO)规格:96T/48T
2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))
2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid 质量规格:>98.0%(HPLC)(T) 酵母菌SD-P/HIS/ADE培养基100毫升
茴香偶酰(>98.0%(GC)) p-Anisil 质量规格:>98.0%(GC) ELISAKitgp130人糖蛋白130规格:48T/96T
2,2-二甲氧基-2-乙酮(>98.0%(GC)) 2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenone 质量规格:>98.0%(GC)
RabbitAmylinELISA试剂盒兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2,4-二乙基硫杂蒽-9-酮(>90.0%(GC)) 2,4-Diethylthioxanthen-9-one 质量规格:>90.0%(GC) 小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒人胱天蛋白酶3(CASP3)酶联吸附测定试剂盒 别称:CPP32, CPP32B, SCA-1, Apoptain, Yama Human
CASP3(Caspase 3) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CASP3浓度
WEHI-3 [WEHI3];小鼠血细胞细胞复苏步骤:
1:水浴锅预热至37℃备用
2:准备15mL离心管,并向其中加入适量培养基待用
3:将细胞冻存管从-80℃冰箱或液氮中取出,放入PE手套中,迅速投入水浴锅
4:用力摇晃冻存管,使其在1分钟内融化
5:用纸巾擦拭水渍,转移至生物**柜。用移液枪吸取细胞悬液,缓慢滴加到步骤2中准备好的离心管
6:1200rpm离心3分钟
7:弃上清,用新鲜培养基重悬细胞,接种至新的无菌培养器皿中
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