细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
商品属性:
细胞名称 M5076;小鼠网织细胞肉瘤
形态特性 梭形
生长特性 半悬浮生长,贴壁细胞呈短梭形。
特征特性 该细胞来源于C57BL/6小鼠卵巢组织自发的网织细胞肉瘤,经细胞形态和功能鉴定后为巨噬细胞来源:该细胞具有吞噬活性;表达Fc受体,与绵羊红细胞形成玫瑰花环;对51Cr标记的红细胞具有抗体依赖的细胞毒反应;对同源小鼠肿瘤细胞(B16-F1)有巨噬细胞样的细胞毒作用,且不需要LPS的激活;没有NK细胞的活性;具有同小鼠腹腔巨噬细胞相当的溶菌酶、非特异性酯酶和磷酸酶的活性;超微结构显示该细胞内有吞噬小泡,缺乏紧密连接,这些特点都符合巨噬细胞的形态特征。核型分析显示该细胞为亚二倍体,因罗伯逊易位,>80%的染色体
培养条件
RPMI 1640 (w/o Hepes) 15% HS
传代方法
1:2~1:3传代,3~4天1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
产品名称
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M5076;小鼠网织细胞肉瘤
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生长特性
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半悬浮生长,贴壁细胞呈短梭形。
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货号
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BJ-01X85243
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细胞STR鉴定服务流程:
下列是公司正在热销的产品:
Hs 746T(胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2单1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate质量规格:>98%,BR
Gibco 17100017 Collagenase
Type I 1gα-萘黄酮α-Naphthoflavone质量规格:>98%, 进口
晶状体上皮细胞裂解物HLEpiCL紫脲酸铵Murexide质量规格:ACS
ALDH3A1 Others
Human ALDH3A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸羟胺Hydroxylammonium chloride质量规格:AR
小鼠色素瘤细胞;B163,3'-二甲基联萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine质量规格:>97%,进分胆戊基碳酸酯
Cholesterol Amyl Carbonate 质量规格: Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒规格:96T/48T
胆正辛基碳酸酯
Cholesterol n-Octyl Carbonate 质量规格:
小鼠凋亡相关因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA试剂盒 ,英文名: Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit
胆己基碳酸酯
Cholesterol Hexyl Carbonate 质量规格:
鸡γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
4-(4-乙氧苯氧羰基)苯基碳酸戊酯(>95.0%(HPLC)) Amyl 4-(4-Ethoxyphenoxycarbonyl)phenyl
Carbonate 质量规格:>95.0%(HPLC) 人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)试剂盒 Human type Ⅱ collagen
helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit
碳酸丁基4-羧苯酯(>98.0%(T)) Butyl 4-Carboxyphenyl Carbonate 质量规格:>98.0%(T) 英文名称Mouselymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit小鼠LFA-3(CD58)规格:96T/48T
水杨酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC)) 4-Octylphenyl Salicylate 质量规格:>95.0%(GC) 冰冻切片组织MAPK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC)) Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate 质量规格:>97.0%(GC)
Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA试剂盒大鼠环0酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
4,4'-双(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N)) 4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene 质量规格:>96.0%(N) 小鼠凋亡相关因子(FAS)ELISA试剂盒 ,英文名: FAS ELISA Kit
4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))
4,4'-Diamyloxyazoxybenzene 质量规格:>95.0%(N) 鸡促黄体(LH)ELISA检测试剂盒ChickenLeinizingHormone,LHELISAKit 96T/48T
4,4'-二丁氧基氧化偶氮苯
4,4'-Dibutoxyazoxybenzene 质量规格:
人Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)试剂盒 Human Cross Linked C-Telopeptide Of Type
II Collagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit人促肾上腺皮质释放(CRH)酶联吸附测定试剂盒 别称:CRF, Corticoliberin Human
CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组CRH浓度。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞产品仅用于科研
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
M5076;小鼠网织细胞肉瘤2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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