细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
商品属性：
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产品名称
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生长特性
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货号
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PA317；小鼠胚胎成纤维细胞
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贴壁生长
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BJ-01X85431
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细胞名称 PA317；小鼠胚胎成纤维细胞
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性
PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，**可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。这株细胞**的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人体。可能因为转入DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。在含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001
mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择，可以选出保留了包装功
培养条件
MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C17
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
细胞STR鉴定服务流程：
下列是公司正在热销的产品：
HUVEC, 脐静脉内皮细胞DAPT (GSI-IX)DAPT (GSI-IX)质量规格：>98%,γ-secretase抑制剂
MN-s, 小鼠纹状体神经元 MSU-1细胞 Ha Fe(羊膜细胞)XAV-939;NVP-XAV
939XAV939质量规格：>98%
急性T细胞白血病细胞;TALL-104胡黄连苷I（标准品）Picroside I质量规格：HPLC≥98%，标准品
F3 Others Mouse 小鼠 F3 / Tissue factor / CD142 细胞裂解液 (阳性对照) 胡黄连苷 II(标准品)Picroside II质量规格：HPLC≥98%，标准品
低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞;OCM-1A胡黄连苷 III（标准品）Picroside III质量规格：HPLC≥98%，标准品rU亚磷酰胺单体 rU Phosphoramidite 质量规格：>98%,BR 英文名称RatVitaminB6ELISAKit大鼠维生素B6(VB6)规格：96T/48T
Bz-rA亚磷酰胺单体 Bz-rA
Phosphoramidite 质量规格：>98%,BR 烘赔食品乙酸激酶法定量检测试剂盒20
i-bu-rG亚磷酰胺单体 i-bu-rG
Phosphoramidite 质量规格：>98%,BR ELISAKitHb-AGE人血红蛋白晚期糖基化终末产物规格：48T/96T
PF299804（EGFR抑制剂）
Dacomitinib 质量规格：>99%,可用于细胞培养 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit
Ac-rC亚磷酰胺单体 Ac-rC
Phosphoramidite 质量规格：>98%,BR 大鼠黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA检测试剂盒Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 96T/48T
素(含柠檬酸盐缓冲液) Tetrodotoxin 质量规格：>98%,进分 人波形蛋白(VIM)试剂盒 Human vimein ELISA Kit
素粉
Tetrodotoxin 质量规格：>98%,进分 Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
AC-DC亚磷酰胺单体 Ac-dC
Phosphoramidite 质量规格：>97%,BR MHPG高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20
2,2'-脱水-5-甲基尿苷 2,2'-Anhydro-5-Me-U 质量规格：>97%,BR
PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA试剂盒猪(EPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T
7-DEAZA-7--2'-脱氧鸟苷 7-Deaza-7-I-2’-dG 质量规格：>97% 小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA 试剂盒人生长分化因子15(GDF15)酶联吸附测定试剂盒 别称:GDF-15, MIC-1, MIC1, NAG-1, PDF, PLAB,
PTGFB, TGF-PL Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组GDF15浓度
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞产品仅用于科研
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
PA317；小鼠胚胎成纤维细胞采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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