细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
商品属性：
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产品名称
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生长特性
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货号
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B16；小鼠黑色素瘤细胞
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贴壁生长
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BJ-01X86144
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细胞名称 小鼠黑色素瘤细胞；B16
形态特性 梭形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤，可以产生黑色素，同基因小鼠体内移植可成瘤。
培养条件
RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1：3传代；3-4天一次
传代情况 PN2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
细胞STR鉴定服务流程：
下列是公司正在热销的产品：
Androstanolone
17-benzoate 1057-07-4 中文名：雄诺龙苯甲酸酯 分子式：C26H34O3 人组织型纤溶酶原激活因子(tPA)酶联吸附测定试剂盒 Human tPA
(Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit
Rosuvastain
Calcium 147098-20-2 中文名：瑞舒伐他汀钙 分子式：C22H28FN3O6S 人纤溶抑制因子(TAFI)酶联吸附测定试剂盒 Human TAFI
(Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit
Ambrisentan 177036-94-1 中文名：安倍生坦 分子式：C22H22N2O4 人纤维蛋白(FBL)酶联吸附测定试剂盒
Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit
Propacetamol 66532-86-3 中文名：盐酸丙帕他莫 分子式：C14H21ClN2O3 人生长受体(GHR)酶联吸附测定试剂盒
Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit
Pirfenidone 53179-13-8 中文名：哌非尼酮 分子式：C12H11NO 人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒莱苞迪甙D（标准品） Rebaudioside
D 质量规格：HPLC≥95.50%，标准品 RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit大鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
老鹳草素（标准品）
Geraniin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 NEUROG基因甲基化程度定量分析试剂盒盒20
酪醇(标准品) Tyrosol 质量规格：HPLC≥98%，标准品 PorcineHeatShockProtein20,HSP-20ELISA试剂盒猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T
雷酚内酯（标准品）
Triptophenolide 质量规格：HPLC≥99%，标准品 小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA 试剂盒
雷公藤红素(标准品) Celastrol 质量规格：HPLC≥98%，标准品 Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒
雷公藤甲素(标准品) Triptolide 质量规格：HPLC≥98%，标准品 humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
雷公藤内酯酮（标准品）
Triptonide 质量规格：HPLC≥98%，标准品 Humanai-parotidductaibodyELISA试剂盒人抗腮腺管抗体(ai-parotidductAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T
类叶升麻苷,毛蕊花糖苷（标准品） Acteoside 质量规格：HPLC≥98%，标准品 植物细胞壁束缚酸性蔗糖转化酶(acidinvease)活性比色法定量检测试剂盒(胞壁)20
利卡灵-B(标准品) (-)-Licarin B 质量规格：HPLC≥98%，标准品 Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管**素受体/含球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
利血平(标准品) Reserpine 质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体β(PPAR-β)ELISA试剂盒 ，英文名： PPAR-β ELISA Kit白头翁素 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-HIS培养基100毫升
白头翁皂苷A HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-LEU/P培养基100毫升
白头翁皂苷B HPLC≥98% 2mg 10倍酵母菌SD-LEU培养基100毫升
白头翁皂苷B HPLC-ELSD≥95% 20mg 10倍酵母菌SD-P/URA培养基100毫升
白头翁皂苷D HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-P培养基100毫升
白鲜碱 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-URA培养基(半乳糖)100毫
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞产品仅用于科研
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
B16；小鼠黑色素瘤细胞通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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