注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研 参数规格:
产品名称
A 组链球菌荧光PCR检测试剂盒
英文名称
详见说明
货号
BJ-R015200
产品运输:低温运输 产品保存:-20℃保存 产品有效期:一年 产品特点: ◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增; ◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝; ◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测; ◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程: 一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 使用方法: 注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。 1. 样本处理(样本处理区) 待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。 2. 扩增试剂准备(PCR前准备区) 取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。 组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。 1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区) 3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。 IL20 Protein Human 重组人 IL20 / Ierleukin-20 蛋白3-奎宁醇(标准品)质量规格:检查用3-quinuclidinol
SNU-5(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞)普伐他汀四甲基丁胺(标准品)质量规格:含量测定Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine
CL-000422RV1(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸伊托必利(标准品)质量规格:含量测定Itopride
FKBP14 Others Human 人 FKBP14 人细胞裂解液 (阳性对照) 福辛普利钠(标准品)质量规格:含量测定Fosinopril
尿道上皮细胞生长添加物UCGS盐酸文拉法辛(标准品)质量规格:>98%,标准品Venlaine EPCAM Others Human 人 EpCAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 双草酰二腙shēng huà shì jì容量:500克
人皮肤色素瘤细胞;SK-MEL-12,6-二异炳基本安 2,6-Diisopropylcnilinq4244/4/2
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照) 聚(甲基酸),英文名或英文缩写:PMMA,级别:3.5N,规格:1克
Eca-109 人食管癌细胞重1克保存:-20℃
HOS人骨肉瘤细胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS85-52-92-本甲酰本2-Benzoylbenzoic acid A 组链球菌荧光PCR检测试剂盒PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) etxyloleate十八1酸乙酯1克AR,99%
大鼠垂体细胞RPC溴酚紫;二溴邻酚磺呋酞;二溴邻酚磺酞;溴酚红 BroMocrqsol purplq;5,5″-DibroMo-o-crqsolsulfonphthclqin;BroMocrqsol rqd 112-40-
BeWo细胞,人胎盘绒膜癌细胞 新生牛眼晶体上皮细胞,NBLE细胞 人无色素睫状上皮细胞HNPCEpiC罗丹明 123 Rhodamine 123 (for fluorescence, ≥90.... 62669-70-9 5MG 染色剂
IAR20(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2DIPSOwo7iumsaltDIPSO单钠盐25克高,98%
786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隐静脉内皮细胞完全培养基100mL 人脐动脉内皮细胞RNAHUAEC miRNA5 μgL-Lacticacidlitxium 10g/25g/100g原装 Sigma L2250