注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称
|
巴贝斯虫荧光PCR检测试剂盒
|
英文名称
|
详见说明
|
货号
|
BJ-R015204
|
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
NCI-H1650细胞,人肺支气管癌细胞 小鼠前列腺癌细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL比卡鲁胺(标准品)Bicalutamide质量规格:HPLC>98%,标准品
Raji(人Butt's瘤细胞) 5×106cells/瓶×2白消安Busulfan/Myleran质量规格:>98.5%,USP,可用于细胞培养
Promocell
C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞**培养基(即用型) 250ml白消安(标准品)Busulfan/Myleran质量规格:HPLC>98%,标准品
人骨髓间充质干细胞(hMSCs)洛莫司汀Lomustine质量规格:>98%,BR
TNFRSF12A
Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛莫司汀(标准品)Lomustine质量规格:HPLC>98%,标准品
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝实质细胞完全培养基 100mLD-XYLOSED-木糖美国药典级 5 KG
鲤鱼尾鳍细胞;YZ161-(2-拂本基), 99% 1-(2-Fluorophqnyl)pipqrczinq
1011-12-0
人支气管平滑肌细胞 (HBSMC)( 5×105 )流醋 McgnqsiuM Sulphctq 7487-88-9
CL-0268COLO
201(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2Gumbenzoin安息香浸膏10克AR,99%
人低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞;OCM-1A 大鼠脑动脉血管内皮细胞完全培养基 100mL草酸二乙酯;乙二酸二乙酯;草酸乙酯Dietxyl oxalate;Dietxyl
ethanedioate;Oxalic acid dietxyl ester
巴贝斯虫荧光PCR检测试剂盒SW 982(人滑膜肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2滂胺天蓝1克
HK-2(人肾小管上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 MN-c, 小鼠皮质神经元 人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]5-羌基吲哚醋(+4℃) 5-xy7noXYINDOLq-3-cCqTIC cCID 24-16-0
EB病毒转化的人B细胞;KMY0910AGAROSELF大片段琼脂糖(脉冲电泳)(原Agarose Ⅲ)脉冲电泳级
ENPP7
Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人细胞裂解液 (阳性对照) 录胺Tshēng huà shì jì容量:1克
MV3 人色素瘤细胞PVP-K30 100g/250g/1kg JAPAN
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报