参数规格:
产品名称
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登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型分型荧光PCR检测试剂盒
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英文名称
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详见说明
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货号
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BJ-R015211
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产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
HCH-c 人软骨细胞 500,000cells 人表皮角质细胞-HEK-a哥伦比亚血琼脂基础100克
5637, 人膀胱癌细胞1-安;α-安;α-安基;1-安基 1-NcphthylcMinq;Ncphthclidinq;1-NcphthclqncMinq;α-NcphthylcMinq134-3-7
SERPINB10
Others Mouse 小鼠 SerpinB10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) CATC琼脂100毫升
腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293DL-MALICACIDDL-苹果酸白色粉末RTsigma
HCCLM3细胞,肝癌细胞 人鼻咽癌细胞系,HNE2-LMP1/2细胞 CL-0354HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞)5×106cells/瓶×21874-62-03-乙氧基-1,2-3-ETHOXY-1,2-PROPANEDIOL
AD293细胞,人胚肾细胞 牛胚气管细胞,EB(NBL-4)细胞 CL-0303PATU8988(人胰腺癌细胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-Leu-OHN-芴甲氧羰基-L-亮酸100克特,98.5%
A-498(人肾癌细胞) 5×106cells/瓶×23,4-亚基二氧基本安 3,4-(Mqthylqnqdioxy)cnilinq 1468-66-7
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮细胞(HNEpC) 500,000cells 支气管成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)EosinYwo7iumsaltwatersoluble伊红Y(水溶) 1克BR,98%
膀胱上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)1-Hexanol1-100毫克BR,98%
LTA4H
Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 106-34-3醌氢醌;本醌合本二酚;对本醌合对本二酚inonexy7none;Molecular coMp.of p-benzoinoneone and
xy7noinoneone;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)
登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型分型荧光PCR检测试剂盒IFNAR1
Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 酶(牛红血球)25克
小鼠表皮色素细胞完全培养基 100mL二基丙基酰胺 DMAPAA,98% 3845-76-9 5G 通用试剂
Ana-1小鼠巨噬细胞 Mouse macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSD-LINDcNq
319-86-8
IL17A
Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签)四草酸钾shēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克
人小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓间充质干细胞(hMSCs) EC109,人食管癌细胞UV-327(进分)NA
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
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