注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研
参数规格:
产品名称
|
多瘤病毒荧光PCR检测试剂盒
|
英文名称
|
详见说明
|
货号
|
BJ-R015214
|
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of
Sain L]小鼠成纤维细胞 NCTC clone 929 [L cell, L-929,
derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Pyruvate 0.11g/L)+10%FBSDL-鸟氨酸盐酸盐(>98%,BC)质量规格:>98%,BCDL-Ornithine, mono
IL1B
Protein Human 重组人 IL-1 beta / IL1B 蛋白DL-1酸(>99%,BP)质量规格:>99%,BPDL-Tartaric acid hydrate
PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺细胞)D-苹果酸(>98%,BR)质量规格:>98%,BRD-Malic acid
CL-0261BC-022(人癌细胞)5×106cells/瓶×2dGTP;三1酸脱氧鸟苷钠盐质量规格:>98%,BR2'-Deoxyguanosine
5'-triphosphate tri salt
IFNB1
Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人细胞裂解液 (阳性对照) dCTP;三1酸脱氧胞苷钠盐质量规格:>98%,BR2'-Deoxycytidine
5'-triphosphate di salt
MLF, 小鼠成纤维细胞外消旋N-去甲基异丙嗪质量规格:美国进口rac N-Demethyl Promethazine
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN 人肝星形细胞完全培养基 100mL异丙嗪亚砜质量规格:美国进口Promethazine Sulfoxide
人视网膜色素上皮细胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羟基雷美替胺质量规格:美国进口4-Hydroxy Ramelteon
IL2RG
Others Human 人 IL2RG / CD132 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 雷美替胺代谢产物M-II (羟基位点R型和S型混合物)质量规格:美国进口Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R
and S at the hydroxy position)
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-5(S)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口(S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
多瘤病毒荧光PCR检测试剂盒HGC-27(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) 人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C假茴香油素,英文名或英文缩写:Pseudocumol,级别:AR,99%,规格:1克
EB病毒转化的人B细胞;KMY10023-异酸酯基基三... 3-Isocyanatopropyltrimethoxysilane
15396-00-6 25G 通用试剂
FST
Others Human 人 FST / Follistatin ( FS288 ) 人细胞裂解液 (阳性对照) 硼轻化;四轻硼;轻硼化 litxium borohydridq; 16949-12-8
MuM-2B 人眼脉络色素瘤细胞十四烷shēng huà shì jì容量:1克
RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 RD human maligna embryonal rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS97-30-3α-甲基D-葡萄糖苷alpha-D-metxylglucoside
- 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报